杆菌肽锌相关的开题报告.doc

毕业设计(论文)开题报告 学 生 姓 名： 学 号： 专 业： 设计(论文)题目： 产杆菌肽锌微生物的育种: 2016 年 2 月 29 日 毕 业 设 计（论 文）开 题 报 告 1．结合毕业设计（论文）课题情况，根据所查阅的文献资料，每人撰写 2000字左右的文献综述 文 献 综 述 1 引言 ?杆菌肽是 1943年由美国哥伦比亚大学的Johnson 在从患者Tracy创伤中分离出的枯草杆菌（bacillus sabtilis）中发现的［1］。在随后的研究中，人们发现了杆菌肽许多优良的特性，使它在兽药、动物饲料添加剂和人医临床等方面得到了广泛的应用。 杆菌肽是类白色至淡黄色的粉末，无嗅、味苦，有吸湿性，易被氧化剂破坏，在溶液中能被多种重金属盐类沉淀。杆菌肽在水中易溶，在乙醇中溶解，在丙酮、三氯甲烷或乙醚中不溶。 杆菌肽本身可抑制、杀灭某些致病菌,当它与Zn2+络合时,其抗菌活性会得到一定程度的增强,从而对革兰氏阳性病原菌,如葡萄球菌、溶血性链球菌、微型球菌、藤黄八叠球菌、非溶血性链球菌、魏氏梭菌、放线菌以及部分革兰氏阴性菌均产生较强的抑制作用,抗菌谱与青霉素类似[2]。杆菌肽的作用机理是由于它是类脂质焦磷酸的特异性抑制剂,能抑制细胞壁所合成的脱磷化过程,影响磷脂载体的转运及向细胞壁支架输送粘肤,从而抑制细胞壁的合成另一方面是与敏感菌的细胞膜结合,损伤细胞膜,使细胞膜的通透性增加导致内粘质外流其次是干扰敏感菌细胞内原浆蛋白的合成[3]。 2 杆菌肽的研究进展 杆菌肽是目前国内外广泛用于饲料中的一种新型的理想广谱抗菌素，它能够有效抑制 G+ 和 G- 细菌,如金黄色葡萄球菌、链球菌等，具有抗菌谱广、排泄快、畜禽吸收量少、安全性评估良好、不产生耐药性等很多优良特性，是饲料添加剂中传统抗生素的有效替代品，已被应用于生物表面活性剂、饲料添加剂、食品防腐剂和作为生物学的研究工具[4]。 目前杆菌肽的工业生产主要通过微生物发酵法制得,地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）是目前广泛应用的工业生产菌种。杆菌肽的发酵生产过程国外报道较多，国内相关报道不多，且发酵水平不高。我国的杆菌肽发酵生产始于 20 世纪 60 年代，1967 年华北制药厂首先在国内生产杆菌肽。随着我国畜牧养殖业的兴起，杆菌肽于上个世纪90 年代开始大量生产，以芽孢杆菌为菌种，玉米和豆粕为主要原料，通过生物发酵、锌络合制备而成[5]。我国天津新星兽药厂选育获得的高产菌株,生产能力为 700μg/ m L, 与国外报道 1200μg/ m L 的水平相差还是很多。国内杆菌肽发酵工业的生产水平亟待提高. 过去，由于在人畜共用抗生素的使用方面管理不严格，造成了交叉耐药菌的发生率快速上升。因此，近年来国际上加强了这方面管理，出台了“人畜共用抗生素在使用上必须相分离”的指导原则，使得杆菌肽成为当今世界销售量最多的饲料添加专用抗生素之一[6]。 随着我国经济的迅速发展和科学技术的不断提高，养殖业的发展脚步也逐渐加快，杆菌肽产品作为多肽类抗生素的一种，对于提高饲料利用率、促进动物生长起着重要作用，在动物养殖中得到广泛应用。因此，要认识到杆菌肽产品的重要作用，充分了解其特性，并且把握其发展前景，合理利用杆菌肽锌和亚甲基水杨酸杆菌肽，促进养殖业的进一步发展。 3 杆菌肽测定的方法 杆菌肽（锌）的检测在实际应用中，Mariko Matsumoto 等曾用 ELISA 法测定鸡血中杆菌肽的残留量，即用辣根过氧化物酶为酶标记物，用杆菌肽抗体 Ig G 测试条进行检测。 该法简便快速，检测底限为 1 ng/m L，回收率范围为 97 %~103 %。 Williams 等通过 ELISA 技术分析了动物饲料中杆菌肽（锌）各组分与抗体的反应情况，以此来监测杆菌肽（锌）在贮藏过程中的稳定性。 Wan 等建立了一种 HPLC-MS/MS 法测定牛奶和动物组织中的杆菌肽 A、黏菌素 A和黏菌素 B 的方法。该方法准确、灵敏，适用于食品中多肽类抗生素的快速筛选和定量检测。 目前，我国官方颁布的检测方法有进出口商品检验局发布的 《出口禽肉中杆菌肽残留量检验方法———杯碟法（SN 0295-93）》、农业部 2004 年发布的 《饲料中杆菌肽（锌）的测定高效液相色谱法（NY/T 726-200）》和国家质检总局（SBTS）2006 年发布的《猪肉、猪肝和猪肾中杆菌肽残留量的测定———液相色谱—串联质谱法 （GB/T 20743-2006）》。2007 年中华人民共和国农业部公告第 824 号，确认了国家兽药残留基准实验室药物检测范围。 3.1杆菌肽效价的测定方法 测定杆菌肽效