实验12Vc含量的测定.ppt

实验十二 维生素C含量的测定 提出问题： 什么是维生素C？ 是性质的检测还是量的检测？ What is Vitamin C? Vitamin C (also called ascorbic acid 抗坏血酸) is a water soluble vitamin found abundantly in many plants. Vitamin C is essential to growth in the human body because it is required for making collagen胶原. However, human cannot make Vitamin C. It has to be provided through diet. The disease that results from a severe deficiency in vitamin C is called scurvy坏血病. People with scurvy get bruises瘀伤 easily. Their skin and teeth also become very unhealthy. 维生素C，又称抗坏血酸，在植物的绿色部分及许多水果、蔬菜中含量丰富，是一类对物质代谢具有重要的作用的水溶性维生素。 参与氧化还原反应。（递氢体） 参与体内羟化反应，Vc是羟化酶的辅酶。 解毒作用 维生素C是具有L系糖构型的不饱和多羟化合物，可分为还原型和氧化型两种形式。根据它具有的还原性质可测定其含量。 什么是维生素C？ 生理特性： 参与体内羟化反应， 参与氧化还原反应， 促进铁吸收防止贫血， 解毒作用， 改善变态反应，提高免疫力， 人体不能自己生产。 物理特性： 水溶性 化学特性: 强还原性 维生素C的生物特性 水溶性 强还原性 提取维生素C的水溶液 通过氧化还原滴定法来测定维生素C。 测定的思路 DCPIP The principle of this method is a titration with dichlorophenolindophenol (or phenol-indo-2:6-dichlorophenol, also known as DCPIP). Ascorbic acid reacts with DCPIP, changing the color from blue to pink to colorless. They react in a 1:1 fashion, so if a known quantity of DCPIP solution reacts with the plant tissue extract, the quantity of DCPIP used gives a direct measure of the quantity of ascorbic acid present. 2, 6-二氯酚靛酚 2, 6-二氯酚靛酚 2 3 当溶液从无色转变成微红色时即表示溶液中的抗坏血酸刚刚被全部氧化，此时即为滴定终点。 粉红色 蓝色 无色 DCPIP 是性质的检测还是量的检测？ 蛋白质的性质实验 蛋白质的两性反应及等电点的测定 溶菌酶的提取 蛋白质含量的测定 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 细菌DNA的提取 UV测定DNA含量和纯度 PCR DNA琼脂糖凝胶电泳 酶的动力学测定 血清SGPT酶活性的测定 用标准品来测定样品 1. 学习定量测定维生素C的原理和方法。 2. 进一步掌握滴定法的基本操作技术。 3. 了解水果及蔬菜中维生素C的含量情况。 【目的和要求】 （一）提取 称取松针2.0克(或其他水果2~10克)，剪碎，放在研钵中； 【实验方法】 加 2%草酸 5-10毫升，研磨成浆状； 滤纸过滤，滤饼可用少量 2%草酸 洗2-3次； 置滤液于50mL容量瓶中, 用2%草酸溶液定容并混匀。 2mL 标准Vc 溶液（0.1mg /mL） 8ml 2%草酸 （二）标准抗坏血酸的滴定 根据所用染料的体积，计算出1ml染料相当于多少毫克(T)抗坏血酸。 分别以0.1% 2,6- 二氯酚靛酚钠溶液滴定至淡红色，并保持15秒不褪色，即达终点。 10ml 2%草酸 （空白对照） 2份 2份 （三）样品的滴定 ① 滤液2份，每份10mL 滴定方法同前。 　 消耗DCPIP的量(ml) 1 2 均值 标准Vc (0.1 mg/ml) 　 　 　 样品滤液 (D ) 　 　 　(VA) 2%草酸 　 　 　(VB) １ml 染料相当于　 T 　mg Vc （四）计算 VA: 滴定样品提取液所用染料的平均毫升数 VB: 滴定空