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4月10日 基因工程(一)
高考频度:★★★★☆ 难易程度:★★★☆☆
基因工程技术包括一系列的分子生物学操作步骤。请回答下列问题:
(1)基因工程操作的核心步骤是____________________。
(2)限制酶、DNA连接酶和___________是基因工程的基本操作工具。其中限制酶的特点是_______________。
(3)Mullis教授因发明PCR技术获1993年诺贝尔奖,PCR技术中需要的酶是_________________,若PCR进行20轮循环,理论上可获得____________个基因片段。
(4)将目的基因导入动物受体细胞的方法是_______________。
(5)周光宇教授提出的花粉管通道法为我国的转基因抗虫棉作出重要贡献,请写出分子水平检测抗虫基因是否表达的方法__________________。
【参考答案】 (1)构建基因表达载体 (2)运载体 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,在特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开(或在特定的部位断开) (3)热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 220 (4)显微注射法 (5)抗原—抗体杂交技术
【试题解析】试题分析:梳理DNA重组技术的基本工具、基因工程的基本操作程序的相关知识,并结合题意进行相关试题的解答。(1) 基因工程操作的核心步骤是构建基因表达载体 。 (2) 限制酶、DNA连接酶和运载体是基因工程的基本操作工具。限制酶的特点是:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,在特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开(或在特定的部位断开)。 (3) PCR技术中需要热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。PCR技术的原理是双链DNA 复制的原理,因此PCR进行20轮循环,理论上可获得220个基因片段。 (4) 将目的基因导入动物受体细胞的方法是显微注射法。 (5) 在分子水平上,检测抗虫基因(目的基因)是否表达,可采用抗原﹣抗体杂交技术。
1.下列关于基因工程工具的说法不正确的是
A. 构建基因文库和构建基因表达载体都需要限制酶和DNA连接酶
B. DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列有专一性要求
C. 载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达
D. 在基因工程操作中,被用作载体的质粒,都是经过人工改造的
2.下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述,错误的是
A.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性核酸内切酶的活性受温度的影响
C.限制性核酸内切酶能识别和切割RNA
D.限制性核酸内切酶可从原核生物中提取
3.如图是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。请据图回答:
(1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在_______________酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在_____________作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的___________序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的_____________序列,再通过化学方法合成所需基因。
(2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加的有机物质有________、__________、4种脱氧核糖核苷酸和耐热性的DNA聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。
(3)由A和载体B拼接形成的C通常称为________________________。
(4)在基因工程中,常用Ca2+处理D,其目的是________________________。
1.【答案】B
【解析】构建基因文库和构建基因表达载体都需要用到限制酶和DNA连接酶,A正确;DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列不具有专一性要求,B错误;运载体的作用是将外源基因导入受体细胞,同时使目的基因在受体细胞中稳定遗传并表达,C正确;在基因工程操作中,被用作载体的质粒,一般都是经过人工改造的,D正确。
2.【答案】C
【解析】大部分酶是蛋白质,少数酶是RNA。酶的活性受温度和pH的影响;限制性核酸内切酶的特点是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割DNA分子。限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离出来的。
3.【答案】(1)逆转录? DNA聚合酶?? 氨基酸? ?脱氧核苷酸
(2)引物?? 模板(A基因)
(3)基因表达载体
(4)使其成为感受态细胞,有利于吸收重组DNA分子
【解析】(1)在利用逆转录过程获得目的基因时,先是以mRNA为模板在逆转录酶的作用下合成单链DNA,然后以该单链DNA为模板在DNA聚合酶的作用下形成双链DNA分子;在利用蛋白质工程合成目的基因时,先根据蛋白质的氨基酸序列推测相应的mRN
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