RNA干扰下调YAP基因对甲状腺癌细胞TPC-1功能的影响.pdf

第37卷第 1期 同济 大 学学 报 (医学 版 ) Vo1．37NO．1 2016年 2月 JOURNALOFTONGJIUNIVERSITY(MEDICALSCIENCE) Feb．。2016 doi：10．16118／j．1008—0392．2016．O1．006 ·基础研 究 · RNA干扰下调 YAP基 因对 甲状腺癌 细胞 TPC．1功能的影响 杨卫国 ，花开尧 ，金佳利 ，房 林 (1．同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科，上海 200072；2．同济大学医学院，上海 200092) 【摘要】目的 检测silA沉默Yes相关蛋白(Yesassociatedprotein，YAP)后的人甲状腺癌TPC一1细胞功能变 化。方法 应用阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine 2000将靶向沉默YAP基因的siRNA序列转染至 甲状腺癌 TPC．1细胞．应用qRT—PCR、Western印迹法检测转染后 TPC一1细胞 YAP基 因及蛋白表达，MTr、平板克隆实验、 TransweU小室、划痕实验和流式细胞术分别检测转染对细胞增殖、侵袭、迁移和细胞周期及凋亡的影响。结果 转 染 siRNA后 。YAPmRNA和蛋白表达明显下降(P0．05)；TPC．1细胞的增殖、侵袭、迁移能力受到抑制，细胞周期 G。／G 阻滞，细胞凋亡未明显上升。结论 抑制甲状腺癌细胞 YAP表达可有效降低细胞的增殖、迁移和侵袭能 力，改变细胞周期分布，但对细胞凋亡无明显影响。 【关键词】甲状腺肿瘤；Yes相关蛋白；siRNA；细胞功能 【中图分类号】R736．1 【文献标志码】A 【文章编号】1008-0392(2016)01—0028～05 EffectofRNA interferencetargetingYAP geneonthyroidcancerTPC一1cells YANG Wei．guo ，HUA Kai．yao ，JIN Jia．1i。 FANG Lin ， (1．Dept．ofBreastandThyroidSurgery，TenthPeople’SHospital，Ton~iUniversity，Shnaghai200072，China 2．MeScalCollege，TongjiUniversity，Shnaghai200092，China) 【Abstract】Objective ToinvestigatetheeffectofsmallinterferingRNA (siRNA)targetingYes associatedprotein(YAP )geneonthyroidcancerTPC一1cells．Methods siRNAtragetingYAPgene wastransfected in thyroid cancerTPC．1 cellswith LipofectarnineMT 2000 ． qRT．PCR and W estern blottingwereconducted todetermineYAP suppression atmRNA nadproteinlevelsby siRNA．MTT assay，colony formation assay，Transwellmigration assaywoundhealing assay and flow cytometry wereused to studyhte effectsofsiRNA on ce