2016-2017高中生物 专题1 基因工程 1.3 基因工程的基本操作程序习题 新人教版选修3.docVIP

专题1 基因工程 1.3 基因工程的基本操作程序 目的基因的获取 1．从基因文库中获取 基因文库种类： 2．利用PCR技术扩增目的基因 含义：是一项在生物体外的核酸合成技术。? 原理：。? 过程：第一步，加热至90~95 ℃ DNA解链为第二步，冷却至，引物与两条单链DNA；第三步，加热至70~75 ℃，从引物起始进行互补链的合成。? 特点：形式扩增。? 3人工合成法：如果基因较小，核苷酸序列又已知，可以通过用化学方法直接人工合成。? 基因表达载体的构建 1组成：目的基因、、、标记基因。? 2功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以给下一代；使目的基因能够和发挥作用。? 3启动子：位于基因的首端，是酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA。? 4终止子：位于基因的尾端，功能是终止。? 5标记基因：鉴别受体细胞中是否含有，从而将符合要求的受体细胞筛选出来。? 三、将目的基因导入受体细胞 转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内的过程。 ．将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法（采用最多的方法） 农杆菌特点：易感染植物和裸子植物，对植物没有感染力；Ti质粒的可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的上。 转化过程：构建的表达载体转入→导入植物细胞→→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 基因枪法 基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。 花粉管通道法我国独创的一种方法 将目的基因导入动物细胞 （1）方法： （2）操作程序：目的基因表达载体 →取卵(受精卵) →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到性动物的内发育→新性状动物。 ．将目的基因导入微生物细胞 （1）原核生物特点：、多为、相对较少等。 大肠杆菌最常用的转化方法是：处理细胞，成为细胞→表达载体与感受态细胞混合→细胞吸收DNA分子 四、目的基因的检测与鉴定 1检测及方法 检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了，采用DNA分子杂交技术。? 检测目的基因是否转录出了，采用分子杂交技术。? 检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用杂交技术。? 2鉴定：除了分子检测外，还需要进行水平的鉴定，如抗虫、抗病鉴定等。? 一、1．基因组文库 2．复制特定50 oC左右． 二、1．启动子2．遗传．．转录过程．目的基因 三、维持稳定和表达．双子叶．（1）显微注射法雌．（1）繁殖快（）用钙离子．（1）目的基因（）（）抗原个体生物学 1．几种目的基因获取方法的比较 从基因文库中获取 人工合成 从基因组文 库中获取 从部分基因文库，如cDNA文库中获取 化学合成法 反转录法 过 程 1．如图为基因工程中目的基因的获取示意图，下列叙述不正确的是 A．③表示PCR技术，用来扩增目的基因 B．可以根据目的基因的相关信息从基因文库中获取所需的目的基因 C．若获取的目的基因相同，则图中基因组文库小于cDNA文库 D．若基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以直接通过人工合成的方法获取 【参考答案】C 【试题解析】③表示PCR技术，可大量扩增目的基因，A正确。可以根据目的基因的相关信息，如核苷酸序列、基因功能、基因在染色体上的位置等，从基因文库中得到所需的目的基因，B正确。基因组文库包括一种生物所有的基因，cDNA文库只包含一种生物的部分基因，故基因组文库大于cDNA文库，C错误。若基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成，D正确。 2．基因表达载体中启动子、终止子的来源 如果目的基因是从自然界中已有的物种中分离出来的，在构建基因表达载体时，不需要在质粒上目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子，因为目的基因中已含有启动子、终止子。 如果目的基因是通过人工方法合成的，或通过cDNA文库获得的，则目的基因是不含启动子和终止子的。若只将基因的编码序列导入受体生物中，目的基因没有启动子、终止子，是无法转录的，因此，在构建基因表达载体时，需要在与质粒结合之前，在目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子。 A．需要限制酶和DNA连接酶 B．抗生素抗性基因可作为标记基因 C．在细胞外进行 D．启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段DNA 【参考答案】D 【试题解析】构建基因表达载体过程中需要用限制酶切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶把目的基因和载体连接起来，A正确；抗生素抗性基因可以用作标记基因，B正确；基因表达载体的构建过程一般在细胞外进行，C正确；启动子位于目的基因的首端，是启动转录的一段DNA，D错误。 3．将目的基因导入不同受体细胞的过程 生物种类 植物 动物 微生物 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 感受态细胞法 受体细胞 体细胞或