甾类激素分析.ppt

（二）游离磷酸 地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠 对照品法 原理： 方法： 检查 游离磷酸 地塞米松磷酸钠 精密称取本品20mg，置25ml量瓶中，加水15ml溶解，精密加钼酸铵硫酸试液2.5ml与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液1ml，加水至刻度，摇匀，在20℃放置30～50分钟，照分光光度法，在740nm处测定吸收度，与对照液4.0ml同法处理的吸收度比较，不得更大。 （对照液 0.0035%KH2PO4） （三）甲醇和丙酮 （灵敏度法） 甲醇 不得出峰 检测限= 3.1ng 丙酮 ≤5.0% 内标法 + 校正因子 GC法 地塞米松磷酸钠 检查 甲醇和丙酮 精密称取本品0.16g，置10ml量瓶中，精密加内标溶液2ml，加水稀释至刻度，作为供试液；另精密量取甲醇10μl(≈7.9mg)与丙酮100μl(≈79mg)置100ml量瓶中，精密加内标溶液20ml，加水至刻度，作为对照液。照气相色谱法测定，含丙酮不得过5.0%，并不得出现甲醇峰。 炔雌醇 硒 (四)、 来源 合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢 剧毒 原理 方法 醋酸氟轻松 检查 硒 取本品50mg，照氧瓶燃烧法进行破坏后，将吸收液转移至100ml容量瓶中，用水15ml冲洗燃烧瓶及铂丝，并入吸收液中，用水加至刻度。取硒对照液（0.05ug/ml）和上述供试品溶液分别用氨试液调节pH值至2.0 0.2后，转移至分液漏斗中，用水 少量分次洗涤烧杯，洗液并入分液漏斗中，使成60ml，各加盐酸羟胺溶液（1→2）1ml，摇匀后，立即精密加二氨基萘试液5ml，摇匀，在室温下放置100分钟，精密加环己烷5ml，强烈振摇2′，静置分层，取环己烷脱水后，测A378nm。 规定 A供＜A对。 四、含量测定 （一）UV法 △４-3-酮 240nm（±） 肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素 苯环 280nm（±） 雌激素 （二）反应分光光度法 1. 适用于非分光光度活性药物 2. 使待测组分光谱位移，避免干扰 3. 增加测定灵敏度 4. 增加选择性 弱、非分光光度活性药物 强分光光度活性药物 化学反应 肾上腺皮质激素类 C17 -α－醇酮基 强还原性 1. 原理 OH - [还原] 四氮唑比色法 [O] OH- 分子重排 三苯甲瓒↓深红 氯化三苯四氮唑 （TTC） 红四氮唑（RT） 蓝四氮唑（BT） 双甲瓒（暗蓝） 2. 方法 ChP TTC（RT） BP TTC（RT） USP BT 对照品法 40～45′ 暗 醋酸泼尼松龙软膏 含量测定 对照液：精密称取醋酸泼尼松龙对照品 20mg，置100ml量瓶中，加无水乙醇振 摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。 供试液：精密称取本品4g（约相当于醋 酸泼尼松龙20mg），置烧杯中，加无水 乙醇约30ml，置水浴上加热，充分搅拌， 使醋酸泼尼松龙溶解，再置冰浴中冷却， 滤过，滤液置100ml量瓶中，同法提取 三次，滤液并入量瓶中，加无水乙醇稀 释至刻度，摇匀，即得。 测定法：精密量取上述溶液各1ml，分 别置干燥具塞试管中，各精密加无水乙 醇9ml与氯化三苯四氮唑试液2ml，摇匀， 再各精密加氢氧化四甲基铵试液1ml， 摇匀，在25℃暗处放置40～50分钟，照 分光光度法，在485nm的波长处分别测 定吸收度，计算，即得。操作应避光。 3. 讨论 （1） 基团对反应速度的影响 C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯 C16无论何种取代基ν↓ 含炔基的甾体激素 银盐沉淀 硝酸银 6. 乙炔基 ↓ 炔雌醇 白 △ KOH (三) 制备衍生物测定m.p. △ △ 香 （四）水解产物的反应 特臭 特臭 △４-3-酮 240nm 苯环 280nm （五） UV法 3300～3000cm-1 3000～2700cm-1 1900～1650cm-1 1650～1450cm-1 1000～650cm-1 （六） IR法 3750～3300cm-1 ν 醋酸可的松 结构特征：△4–3–酮、C17 –OH C20 –酮基、 C11 –酮基、醋酸酯 1630cm-1 ν 3420cm- 亚甲基、角甲基吸收带 1750cm-1 1232cm-1 1052cm-1 结构特征：△4–3–酮、C17 –OH C17–乙炔基 炔诺酮 1650cm-1 ν 3