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昆虫杆状病毒杀虫剂 昆虫杆状病毒 昆虫杆状病毒是一类专门寄生节肢动物的病原微生物。其宿主特异性高，一种病毒往往只感染一种或几种近缘昆虫，不感染脊椎动物。因此，这类病毒对人、畜及环境安全，且病毒粒子被包埋在蛋白质晶体内使其十分稳定，作为杀虫剂在虫害的生物防治中具有很大的经济效益和生态效益。  昆虫杆状病毒 昆虫杆状病毒基因组大小为80～180kb，DNA分子呈超螺旋双链闭合环状。其病毒粒子是由杆状核衣壳和包被它的2层脂蛋白囊膜所组成，而核衣壳则包括蛋白质衣壳和病毒DNA分子与碱性蛋白构成的髓核。在感染宿主细胞后能够产生2种表型的病毒：一种是包涵型病毒，另一种是芽生型病毒。包涵型病毒主要进行昆虫之间的感染传播，而芽生型病毒则负责昆虫体内感染的扩散。  野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 我国的昆虫病毒防治开始于1973年左右, 蒲蛰龙等在广东首次发现马尾松毛虫质多角体病毒( DpCPV )。1988 - 1993 年间, 在湖北、新疆、河南、河北等省利用松毛虫CPV 病毒防治松毛虫, 总计面积约7万hm2, 其防治效果相当于当前的高效化学农药。 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 另一项应用广泛的病毒是棉铃虫NPV 病毒。20世纪70年代, 我国产棉区广泛开展了利用棉铃虫NPV防治棉铃虫的田间试验, 并在湖北兴建了第一座国家投资建设的年产能力为30t的棉铃虫NPV制剂工厂。 武汉大学刘年翠等(1978)开始对菜粉蝶颗粒体病毒(PrGV)进行了系统深入的基础和应用研究。该制剂在我国29个省市、216个单位进行了1.33万hm2 田间试验,标志着昆虫病毒杀虫剂应用研究和产业化基本模式已经形成。 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 戴冠群等(1973)在广州地区首次分离到斜纹夜蛾核型多角体病毒(PINPV)后, 中山大学昆虫学研究所与广州市中达生物工程有限公司合作, 于1998年生产出商品化的 “虫瘟一号”病毒杀虫剂, 杀虫效果良好, 年产量达30t以上。 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂具有对人畜、环境安全，且不产生严重抗性的优点，但是其缺点也很明显。首先是杀虫谱狭窄，相对于化学农药的广谱，其一般只对几种昆虫起作用，如家蚕病毒（BmNPV）不感染柞蚕，而柞蚕病毒（ApNPV）也不感染家蚕，有些病毒虽然也交叉感染，但其对其他宿主的感染毒力显著降低。其次是潜伏期长，杀虫速度缓慢。其对害虫的田间致死时间一般需7～14 d，而不像化学农药那样快速杀灭害虫。 重组型昆虫杆状病毒杀虫剂 杆状病毒进化生物学研究结果表明杆状病毒具有共同的起源。从这个共同的祖先开始，杆状病毒的差异程度随着病毒基因组上的许多单基因或基因片段的获得或缺失不断增大。 随着分子生物学研究的不断深入，为了克服野生型昆虫杆状病毒杀虫剂的缺点，科学家开始尝试各种分子生物学改造以获得重组昆虫杆状病毒。 重组型昆虫杆状病毒杀虫剂 近年来，这方面的研究主要集中在以下几个方面： ⑴修饰病毒本身基因以提高杆状病毒的感染力; ⑵在杆状病毒基因组中插入外源基因以增强病毒毒力（研究较多）; ⑶用异源病毒重组来扩大杆状病毒杀虫谱。 ⑴修饰病毒本身基因 e.g.缺失egt基因?? egt基因是杆状病毒在个体水平调控感染宿主生长发育的唯一已知基因。缺失egt基因的重组病毒可引起幼虫生长发育代谢的失调, 加速感染虫体的死亡。 OReily等(1991)发现银纹夜蛾核多角体病毒的一个早期非必需基因蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖转移酶基因, 该基因受早期启动子控制, 编码的一个506aa蛋白能阻止幼虫蜕皮和化蛹, 促进病毒自身的增殖。缺失该基因的重组病毒能比野生型病毒提早27.5h杀死粉纹夜蛾幼虫, 受感染的幼虫取食量也减少了40% 。 ⑵插入外源基因 e.g.插入植物蛋白酶抑制剂基因 植物蛋白酶抑制剂基因编码的植物蛋白酶抑制因子作为植物抵抗害虫的天然防御体系, 近年来已引起人们的注意。季平等(1996)把慈姑蛋白酶抑制剂B基因插入家蚕BmNPV 基因组中, 获得了带慈姑蛋白酶抑制剂B基因的重组家蚕BmNPV。重组病毒对家蚕的致病能力比野生型病毒稍有增强的倾向,半数致死时间( LT50 )可提早10h左右。 ⑶用异源病毒重组来扩大杆状病毒杀虫谱