免疫检验终版放大版.doc

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免疫检验终稿 主要组织相容性复合体:编码主要组织相容性抗原的基因是一组紧密连锁的基因群,呈现高度的多态性。 钩状效应:是指当待测抗原浓度过高时,过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制夹心复合物的形成,这种现象称为钩状效应。 多聚酶链反应(PCR):是一项对特异性DNA片段进行非细胞依赖性的体外扩增技术。 免疫缺陷:由遗传或其他原因造成的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全。 免疫学是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。 免疫系统的三大生理功能:免疫防御(指机体排斥外源性异物的能力)、免疫自稳(指机体识别和清除自身衰变残损的组 织细胞的能力,以维持正常内环境稳定)、免疫监视(指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长)。 免疫应答反应:是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。 免疫应答的过程:识别阶段、活化阶段、效应阶段 免疫系统功能的生理和病理表现 功能名称 生理功能 病理表现 免疫防御 清除病原微生物及其它抗原性异物 超敏反应(强) 免疫缺陷病(弱) 免疫自稳 清除损伤或衰老细胞 自身免疫性疾病 免疫监视 清除突变或畸变细胞,防止肿瘤发生、杀伤病毒感染细胞 肿瘤或病毒持续性感染 免疫系统:由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。分为中枢免疫器官(骨髓和胸腺)和外周免疫器官(淋巴结、脾脏及扁桃体) 免疫分子是由一些免疫活性细胞或相关细胞分泌的蛋白质及小分子多肽物质组成,它们参与机体的免疫反应或免疫调节。(免疫球蛋白Ig、补体系统C、细胞因子、细胞粘附分子CAM 、白细胞分化抗原CD) 免疫球蛋白是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞后所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等体液中,分为分泌型Ig和膜型Ig。 补体:是存在于人和脊椎动物血清与组织液中一组经活化后有酶活性的蛋白质。作用:补体介导的细胞溶解作用、调理和免疫粘附作用、参与炎症反应、清除免疫复合物作用、免疫调节作用。 抗原抗体反应:原理1)抗原决定簇与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性2)抗原决定簇与抗体超变区的沟槽分子表面的结合3)抗原表位与抗体超变区必须紧密接触,才可能又足够的结合力。特点:1)特异性:抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能 2)可逆性:是指Ag与相应Ab结合成IC后,在一定条件下可解离为游离抗原与抗体 3)阶段性:第一阶段:特异性结合阶段 (①反应速度快,几秒钟或几分钟即可完成 ②不出现肉眼可见反应)第二阶段:可见阶段(表现为凝集、沉淀、补体结合等反应 ①反应进行慢,需要几分钟、几十分钟或更长②受电解质、温度、酸碱度等多种因素影响)4)比例性:(最适比或等价点)是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系,只有当二者浓度比例适当时,才出现可见反应 简述环境因素对抗原抗体反应的影响:⑴电解质 抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体,此时易受电解质影响电解质存在可中和胶体颗粒上的电荷,使胶体颗粒上的电势下降形成可见的沉淀或凝集物,若无电解质存在则不出现看见反应,但电解质浓度过高则出现盐析。⑵酸解度:pH过高或过低都可以影响抗原和抗体的理化性质,抗原抗体反应一般以pH6-9为宜。⑶温度:抗原抗体反应一般在15-40℃范围进行,在h此范围温度越高,反应越速度越快,但容易引起复合物解离。抗原抗体反应最适温度为37℃, 特殊的抗原抗体反应需特定的温度,如冷凝集实验,在4℃进行,高于20℃,抗原抗体复合物解离.⑷适当振荡与搅拌可促进抗原抗体分子接触,加速反应。 抗原抗体间的结合力:静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力。 亲和力:抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力,是抗原抗体间固有的结合力。 抗体的亲和力:是指一个抗体分子豫整个抗原表位之间结合的强度,与抗体结合价直接相关。 抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性 交叉反应:两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清发生反应 免疫原是诱导机体产生抗体并能与抗体发生反应的物质。半抗原是指仅有抗原性而无免疫原性的物质,与载体结合后可具有免疫原性。 免疫佐剂是先于抗原或与抗原一起注入机体,可增强机体对该抗原的特异性免疫应答或改变免疫应答类型的物质。最常用于免疫动物的佐剂是弗氏佐剂。 佐剂的作用机制:1)改变抗原物理性状,延缓其降解和排除,更有效刺激免疫系统2)刺激单核-吞噬细胞系统,增强其处理和提呈抗原的能力3)刺激淋巴细胞增殖和分化。 杂交瘤单克隆抗体制备技术的原理:利用聚乙二醇作为细胞融合剂,

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