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特殊染色在临床病理学中的应用;染色的意义和目的; 应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的显色剂,显示组织或细胞的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,称特殊染色(Special staining) 。 ;染料和染色的原理;染料和染色的原理;染料和染色的原理;例如脂肪染色:
苏丹类染色剂在脂质中的溶解度>酒精中的溶解度
溶解于酒精的苏丹类染色剂与组织中的脂质接触时,染色剂就从溶液中“转移”到脂质中,从而使脂质着色。 ;染料和染色的原理;普通染色:又称常规染色,即指HE染色(haematoxylin and eosin HE)
特殊染色:除HE以外的所有染色,显示特定的组织结构和成分。
单一染色:用一种染料进行的染色,如甲苯胺蓝染幽门螺杆菌
多色染色:用两种以上染液染色的方法,如三色染色
对比染色:又称复染或衬染,先将某一成分或结构染色后,再用另一种染料染其他成分,如苏木素衬染细胞核;进行性染色:渐进性染色,采用低浓度的染液,使组织成分着色自浅入深,直到达到合适强度,
退行性染色:又称后退性染色,先使组织着色过度,再用某些溶液脱去多余染液,达到合适染色强度
媒染剂:具有促进染色能力,对染料和组织都有亲和力并与染料和组织结合在一起的试剂。如硫酸铝钾等
;促染剂:促使染料着色,增强染色能力,但本身不参与染色反应,如乙酸
异染性染色:组织经过盐基性染料染色后,出现与染料不同的颜色
分化:指用某种溶液选择性脱去过深的着色,并使不应着色的组织细胞成分脱色的过程,HE染色时的盐酸酒精分化
蓝化作用(返蓝):苏木素在酸性条件下呈红色,碱性条件下呈蓝色,HE染色时在酸分化后,再用碱性水使核变蓝,称蓝化
;按照染色方法分类
一般方法分类:常规染色,特殊染色等
按主要组织和细胞成分分类:结缔组织染色,肌组织染色,神经组织染色
按染色对象种类分类:切片染色法,组织块染色法,大体标本染色法
;按发明者姓名命名:如Van. Gieson(VG)染色
按所有染料分类:如苏丹IV染色,锇酸染色
按所染组织分类:如网状纤维染色
其他分类:;选择适当的组织处理方法:包括固定液和切片的选择,如脂肪和酶类染色需冰冻切片
染色液的有效期和保存方式
染色液的浓度和pH值
染色时间的控制
染色前切片的预处理:如脱甲醛色素,脱汞盐固定液的汞结晶等;注意特染的应用范围,如某种病变应用什么方法染色才能达到目的,一般根据HE切片所见,选择适当的特染方法。
必须掌握各种特殊染色的结果,避免导致错误的结论或严重的误诊,如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。
应做阳性切片作对照,保证染色结果的可靠性。
染色所用的器皿都必须清洗。;常用染色方法和应用; 结缔组织由细胞和细胞间的骨架成分构成,分为无定形的间质(如硫酸盐和非硫酸盐黏多糖)和定形或纤维型间质(如胶原纤维,弹力纤维。网状纤维)。各种纤维成分的识别有助于病理学的诊断和鉴别诊断。;网状纤维的特性
网状纤维是构成组织的网状支架
广泛分布于实质器官内,其中最丰富的区域是肝脏、脾脏、淋巴结、骨髓、基膜、血管等
形态学上为交织成网的纤细纤维
化学成分为网状蛋白,一种特殊的胶原蛋白,抗酸
病理状态下可转化为胶原纤维
具有嗜银性,又称嗜银纤维
HE染色着色淡,特殊染色可显示 ;网状纤维染色的原理
网状纤维染色方法很多,但基本原理相同,即经过氧化剂的氧化使网状纤维对银离子具有选择性的亲和能力(嗜银性),并在媒染剂的作用下网状纤维吸附二氨合银离子,在经甲醛将其还原为黑色金属银而显示出网状纤维。;常用网状纤维的染色方法
Gomori染色法
结果:网状纤维呈黑色,胶原纤维呈黄色或黄褐色,细胞核呈灰黑色。
特点:此法简单可靠,染色时间短,常用于活检病理组织检查。;网状纤维染色的应用
肿瘤的诊断和鉴别诊断:
癌和肉瘤的鉴别:癌巢周围存在网状纤维;肉瘤中网状纤维围绕每个细胞
尤文氏瘤和淋巴瘤:尤文氏瘤无网状纤维,淋巴瘤内存在大量网状纤维
脑膜瘤和胶质瘤:脑膜瘤有网状纤维。胶质瘤少;网状纤维染色的应用
某些梭形细胞肿瘤的诊断:已被免疫组化取代,很少用
①平滑肌瘤的瘤细胞间可见大量平行分布的网状纤维;
②纤维肉瘤则见大量网状纤维密集包绕细胞;
③滑膜肉瘤的梭形细胞产生网状纤维少。;网状纤维染色的应用
判断组织坏死的性质和预测坏死后的结局:
①、凝固性坏死:用网染可以观察到早期凝固性坏死处网状纤维支架还保留的特点。
②、肝炎的坏死范围和程度:如网状支架塌陷,则演变成肝硬化。
;网状纤维染色的应用
骨髓网状纤维染色:
;580例骨髓病变网状纤维的染色结果;胶原纤维是结
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