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2.1微生物的实验室培养要点
选择培养基 * * 常见的三种细菌典型形态 A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 课题1 微生物的实验室培养 (一)培养基: 1、培养基概念 按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质。 营养物质 生长繁殖 2、培养基种类 包括 培养基和 培养基等。 3、培养基的化学成分 一般都含有 、 、 和 四类营养成分。还需要满足微生物生长对 、 及 等的要求。 固体 液体 水 碳源 氮源 无机盐 pH 特殊营养物质 氧气 培养、分离出特定的微生物 添加(或缺少)某种化学物质 选择培养基 鉴别不同种类的微生物 添加某种指示剂或化学药品 鉴别培养基 目的用途 工业生产 由天然成分配制而成, 培养基成分不明确 天然培养基 菌种分类、鉴定 由已知成分配制而成, 培养基成分明确 合成培养基 化学组成 工业生产,连续培养 不加入琼脂 液体培养基 观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等 加入琼脂较少 半固体培养基 微生物的分离、计数等 加入琼脂较多 固体培养基 物理性质 主要应用 配制特点 培养基类型 标准 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入四环素、卡那霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 可抑制细菌、放线菌细胞壁主要成分肽聚糖的合成 其细胞壁是由纤维素、几丁质、葡聚糖组成 菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 (二)无菌技术 1、无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括以下四个方面 (1)对实验操作的 、操作者的 ,进行清洁和 ; (2)将用于微生物培养的器皿、 和 等进行 ; (3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行; (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 空间 衣着和手 消毒 接种用具 培养基 灭菌 酒精灯火焰 2、消毒和灭菌 (1)消毒:消毒是指使用 方法仅杀死物体表面或内部一部分 的微生物, (包括;不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 消毒法、 消毒法、 消毒法。 (2)灭菌:灭菌是指使用 杀死物体内外 , (包括,不包括)芽孢和孢子,常用的方法有 灭菌、 ___灭菌和 灭菌。 较为温和的物理或化学 对人体有害 不包括 煮沸 巴氏 化学药剂 强烈的理化因素 所有的微生物 包括 灼烧 干热 高压蒸汽 [思维激活] 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?70%与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么? 提示 酒精擦拭属化学消毒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 消毒的方法: 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5~6min 2、巴氏消毒法:70~75℃下煮30min或80℃下煮15min 3、用体积分数为50%~70%酒精溶液等进行皮肤消毒 4、氯气消毒水源 5、紫外线消毒 灭菌的方法: 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌:160~170℃下加热1~2h 3、高压蒸
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