2.2.1动物细胞培养和核移植技术-课件.ppt

植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 动物细胞常用的技术手段呢？ 植物组织培养, 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞核移植 动物细胞工程常用技术 资料分析 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想怎样才能获得大量的健康的皮肤？ 一、动物细胞培养： 1、概念 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。是其他动物细胞工程技术的基础 2.动物细胞的培养过程 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 转入培养液中 进行培养 单个细胞 1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物； 3、用胃蛋白酶可以代替胰蛋白酶吗？ 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 2、动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 这些组织或器官 上的细胞生命力 旺盛，分裂能力强 细胞贴壁生长 接触抑制 接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞 的接触抑制。 10—50代之后 失去接触抑制 部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。 相关概念 ① ：悬液中分散的细胞贴附在 瓶壁上。 ② ：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞_________ 的现象。 ③ ：指动物组织消化后的初次培养。 ④ ：贴满瓶壁的细胞，出现 后，需要重新用________ 等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖 的培养过程。 答案 停止分裂 增殖 接触抑制 胰蛋白酶 填一填 培养条件 ①无菌、无毒的环境：培养液中添加一定量的 ，并定期________ ，以清除 ，防止对细胞自身造成危害。 抗生素 答案 ②营养 无机物：无机盐、微量元素 有机物：糖、 、 和天然成分： 等 ③温度和pH 温度：哺乳动物多以 为宜 pH：多数细胞适宜pH为_______ ④气体环境 O2：细胞代谢所必需 CO2：_______________ 更换培养 液 代谢产物 氨基酸 促生长因子 血清、血浆 36.5±0.5 ℃ 7.2～7.4 维持培养液的pH 加入的气体是（ ）的混合气体 3、动物细胞培养技术应用 （1）、大规模培养生产生物制品（病 毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） （2）、作为基因工程中的受体细胞 （3）、培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 （4）、为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 细胞的全能性 细胞增殖 植物组织培养和动物细胞培养的比较 固体培养基 液体培养基 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 植物体 细胞 快速繁殖、培育无病毒植株 获得细胞或细胞分泌蛋白 动物细胞培养过程能体现细胞的全能性吗？为什么？ 不能；动物细胞培养的结果是细胞，没有发育成完整的个体。 二、动物体细胞核移植技术 和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 克隆动物 用核移植方法得到的动物 1、动物核移植： 供体细胞 （供核） 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质） 去核 无核卵 母细胞 注入 细胞 融合 重组细胞 构建重组 胚胎 胚胎 移植 代孕 母体 生出与供体奶牛遗物质基本相同的犊牛 归纳: 1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植 2.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状