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2016-2017高三生物选修3二轮复习练习题要点
1.(2016上海卷.九)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
在图27所示的质粒PZHZ11(总长为3.6kb,1kb=1000对碱基因)中,lacZ基因编码β-半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。
(1)若先用限制酶BamHI切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,再加DNA连接酶进行连接,最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含3.1kb质粒的细胞颜色为;含3.6kb质粒的细胞颜色为。
(2)若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段,形成4.9kb的重组质粒,则目的基因长度为kb。
(3)述4.9kb的重组质粒有两种形式,若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段;那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则可获得
kb和kb两种DNA片段。
(4)若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,那么上述过程属于。
A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程
【来源】专题16 现代生物科技
【答案】(1)白色 白色和蓝色/白色或蓝色
(2)1.8
(3)1.4 3.5
(4)C
【解析】(1)3.1kb质粒lacZ基因被破坏,含3.1kb质粒的细胞颜色为白色;加DNA连接酶进行连接,被切下的片段可能反向连接,所含3.6kb质粒的细胞可能含有正常质粒和异常质粒,也可能只含有正常质粒或异常质粒,颜色为白色和蓝色(白色或蓝色)。
(2)pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段被切除后,剩余3.1kb,将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因插入,形成4.9kb的重组质粒,则目的基因大小为4.9-3.1=1.8kb。
(3)限制酶BamHI和BglHI切割产生的黏性末端可以进行连接,但连接后不能被两者中的任何一个识别并切割,用BamHI切割4.9kb的重组质粒,只有一个切割位点。用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段;联合酶切同等长度的另一种重组质粒,可获得1.7+1.8=3.5kb和3.2-18=1.4kb两种DNA片段。
(4)题干所述目的是让人的基因在植物细胞中表达,属于植物基因工程。
【考点定位】本题主要考查基因工程。
【名师点睛】本题考查限制酶和DNA连接酶的使用,属于较难题。解答本题的关键是明确DNA连接酶在进行连接时,插入的片段可能有正反两种插入方式。本题68题第二空、70题容易发生错误,错因在于未能考虑到上述情况。
2.(2016江苏卷.33)(9分)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用______两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过__________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于__________________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加__________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中_____________。
(3)若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 ,对于该部位,这两种酶 (填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得 种大小不同的DNA片段。
【来源】专题16 现代生物科技
【答案】(1)BclI和HindⅢ 连接 感受 (2)四环素 引物甲和引物丙
(3) 都不能 (4)7
【解析】(1)选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamH I可能使质粒中启动子丢失,因此只能选BclI和HindⅢ。酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于感受态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,根据质粒上的抗性基因,应在筛选平板培养基中添加四环素。PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合,沿相反的方向合成子链。
(3)根据BamH I和Bcl I的酶切位点,BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为,与两种酶的酶切位点均不同。
(4)根据BamH 、Bcl I和Sau3A I的酶切位点,
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