反相高效液相色谱法测定1-萘磺酸和2-萘磺酸的研究.pdf

研究了甲醇浓度对此二萘磺酸保留的影响 实 验 部 分 见（图1）。当着流动相中的甲醇浓度在30 一（）仪器 LC-4AHPLC色谱仪， —45％范围，其流速为0.5ml/min时，此二 SPD-1型紫外-可见分光光度检测器、R- 组分可完全分离开。 122T型记录仪和C-R2A型积分仪均为日本 二（）流动相中硫酸锂浓度的影响 岛津公司产品；粒径为5-6m的Zorbax 选用38％甲醇水溶液作流动相，分别研 ODS色谱柱 2（50mm 4.6mm内径）为美 究了其中含不同浓度的硫酸锂、硫酸钠、磷 国杜邦公司产品。 酸二氢钾和溴化四丁基铵对1- 2-萘磺酸保 二（）试剂与溶液 1萘磺酸 化（学 留的影响。发现在此流动相体系中，加入 纯，上海试剂三厂）经酸碱滴定法间接标定 硫酸锂为佳。随着流动相中硫酸锂浓度的增 后，按下述操作步骤，用ZorbaxODS制备 柱 2（50mm 9.4mm内径）经多次进样，每 次于此化合物保留处的峰宽范围内收集经纯 化的1-萘磺酸并配制成浓度为250g/m1的 50％甲醇水溶液。2-萘磺酸 分（析纯，E. Merck）配渲制成浓度为2.50mg/ml的甲醇 溶液，用50％甲醇水溶液适当稀释成浓度为 250g/m1的工作溶液。苯甲醇 分（析纯， 上海试剂一厂）先配制成1.00mg/ml甲醇 溶液，继用50％甲醇水溶液稀释成200g/ mL工作溶液。其它所用试剂均为分析纯 级。 流动相为含 0.125mo1/L硫酸锂之38％ 甲醇—62％水 体（积比）溶液。 三（）实验步骤 吸取经0.45m孔径之 滤膜过滤过的含1和2-萘磺酸及苯甲醇 （内 标）之试样溶液20l，经进样口注入色谱柱 上，流动相流速为 0.50ml/min，淋出液中 的各组分借分光光度检测器于 220nm处检 测。试样中的此二萘磺酸的量以苯甲醇为内 标用峰面积法来测定。 结 果 与 讨 论 一（）流动相中甲醇浓度的影响 仅借甲醇-水之简单的二元流动相体 系，欲从ZorbaxODS柱中将1-与2-萘磺酸 分离开是困难的，因为任何改变流动相中的 甲醇浓度，乃至将其流速降到0.1m1/min， 此二化合物的保留也几乎完全相同。于此二 元流动相体系中，加入 0.125mol/L硫酸锂， 加，此二组分在柱上的保留也增长 见（图 2），且也使二者的峰拖尾得到有效的抑 制。 三（）色谱图与响应因子 图3是含1-和2-萘磺酸及苯甲醇的标准 溶液按上述实验步骤所得的色谱分离图，其 保留时间分别是21.3，24.9和27.2min。 用苯甲醇作内标，以不同比例的1-萘磺 酸与2-萘磺酸的混合标准溶液，进行了二者 的响应因子 f（）的测定，其结果列于表1。 以二组分之保留处的信噪比 （以峰高计）为 2:l时，此方法的检出限为0.4ng1-萘磺酸和 0.5ng2-萘磺酸。 表 1 响 应 因 子 表 2 1和 2-萘 磺 酸 的 回 收 试 验 （四）回收试验与试样分析 485(1980). 取不同比例的1-与2-萘磺酸并加有苯甲 8 P.JanderaandJChuracekJChromatogr., 197,181(1983). 醇作内标的混合溶液，进行了回收试验，所 9 U.StreuleandA.V.WatteawylChroma- 得结果列于表2。在同时测定此二萘磺酸 tographia12,25(1979).