酸乳中乳酸菌的分离鉴定及其活力的测定.ppt

酸奶中乳酸菌的分离培养 经过对乳酸菌菌落的观察，发现在MRS 琼脂培养基的7个平板上，10-7稀释度的菌落观察是最好的。经过MRS琼脂培养基分离的菌株, 有较大的菌落、透明、呈灰白的颜色、两面是凸起来的。镜检进一步观察，革兰氏染色阳性，油镜下观察，呈杆状的为保加利亚乳杆菌，呈链状并且为一个一个小球形的为是热链球菌。 嗜热链球菌的生化鉴定结果 嗜热链球菌的试验分析：葡萄糖和蔗糖糖发酵试管中的培养基由原来的紫色变化为黄色, 麦芽糖发酵培养基没有改变颜色, 45℃的温度下可以生长繁殖 保加利亚乳杆菌的生化鉴定结果 保加利亚乳杆菌的试验分析：乳糖发酵试管中的培养基由原来的紫色变成了黄色, 葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、七叶苷均都没有改变颜色 糖发酵试验 嗜热链球菌的生化鉴定结果 保加利亚乳杆菌的生化鉴定结果 链球菌的生化特性 嗜热链球菌：能在 50℃条件下生长 30 min, 不能在 pH9.2、4.0% NaCl 条件下生长, 不可以水解精氨酸, 不产生氨气, 而且麦芽糖、蔗糖、棉子糖发酵都为阴性反应的乳酸链球菌。 乳杆菌的生化特性 保加利亚乳杆菌不可以水解精氨酸, 乳糖发酵反应是阳性, 而其他四种糖（阿拉伯糖、麦芽糖、七叶苷、蔗糖、棉子糖、纤维二糖、核糖发酵）都是阴性反应的乳杆菌。 生理生化试验结果 酸奶中乳酸菌的菌落数测定结果 用直接计数法，记录每个平板的菌落数，然后计算每个样液同一稀释度下的两个平板的平均菌落数。 观察计数发现稀释度在10-7时计数最适宜，菌落数在30-300之间。 酸奶样品测定在出厂间隔时间为3d时，蒙牛酸奶中的乳酸菌数分别为295、297；酸奶样品测定在出厂间隔时间为6 d时，蒙牛酸奶中的乳酸菌数分别为273、271；酸奶样品测定在出厂间隔时间为9 d时，蒙牛酸奶中的乳酸菌数分别为212、213。 Chapter * * * * * * * * * * * * * * * * * 指导老师：李作美 班级：2012级食品质量与安全 学生：芦雯 学号：51206041015 目录 概述 1 2 材料与方法 3 结果与分析 4 结论 5 致谢 背景 酸奶是日常生活中的一种传统的受欢迎的发酵型的乳制品，它的营养价值含量相当的丰富，并且对人体有很好的保健功效。 意义 蒙牛冠益乳中的乳酸菌主要为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。测定乳酸菌的OD值和产生酸能力来评定酸乳中乳酸菌的活力，对乳酸菌活力的测定，判定酸奶的最佳饮用时间，为酸奶的消费提供科学的依据，同时也对微生物做出研究。 1. 概述 材料：蒙牛冠益乳 A 设备：高压灭菌锅 CO2培养箱 电子天平 冰箱 鼓风干燥箱 超净工作台 光学显微镜 B 2. 材料与方法 材料与设备 酸奶中乳酸菌的 培养分离 酸奶中乳酸菌 菌落数的测定 生化试验鉴定 乳酸菌 产酸能力的测定 生长曲线的绘制 实验方法 1．培养基的配制 称取MRS琼脂培养基66.2g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，加热煮沸后，装入锥形瓶中，121℃高灭菌15min备用。 2．菌悬液的配制 （1）拿1支洁净的锥形瓶，加入225mL的生理盐水； （2）取7只洁净的试管，各盛9mL的生理盐水； （3）塞上棉塞，用报纸包裹扎紧后，放入103kPa、121℃高压蒸汽灭菌20min； （4）用玻璃棒将酸奶样品搅拌均匀，吸取酸奶25mL，加入放有225mL无菌生理盐水的锥形瓶中，充分振摇，让酸奶样品均匀散布，这就是10-1的酸奶样品稀释液； （5）将7支盛有9mL生理盐水的无菌试管，分别标记为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8，利用无菌移液管吸取10-1的酸奶样品稀释液1mL，分别加入盛有9mL无菌生理盐水的试管中，再次稀释，得到10-2稀释液，同理得到 10-3-10-8的样品稀释液。 3．倒平板 把经高温高压灭菌的MRS琼脂培养基冷却到45℃左右，按无菌操作法倒7只平板，倒平板时注意量的把握，浅浅的一层，待凝固。 4．分离方法 用一支1mL无菌移液管分别吸取10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7和10-8的稀释菌悬液各1mL，分别接种在与之相对应的7个无菌平板中，每个平皿放稍许；马上用无菌玻璃涂棒将样品菌液均匀地涂布在平板，放置一段时间后，将之倒置，最后放入37℃恒温箱中培养48h。 5．菌落观察 恒温培养48h过后，取出培养平板；观察培养基内菌落的形态，找出乳酸菌菌落。 6．镜检 选取一块干净的载玻片，在载玻片的中央滴加一滴生理盐水，在无菌操作法的环境下，用接种环挑取少量乳酸菌涂片；结晶紫初染→碘液媒