转基因杨树中农杆菌残存状况分析.pdfVIP

第 32卷第 3期 河 北 农 业 大 学 学 报 VO1．32NO．3 2009年 5月 JOURNALOFAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI Mav．2009 文章编号 ：1000—1573(2009)03—0067一O4 转基因杨树中农杆菌残存状况分析 缪丽萍 ， 张千千 ， 张 军 ， 杨敏生 ， 王连荣 (1．河北农业大学 林学院，河北 保定 071000；2．河北北方学院 园艺系 ，河北 张家 口 075131) 摘要 ：以转发根农杆菌741杨为材料 ，在继代和移栽过程中对其残存农杆菌进行追踪检测 。结果表明：培养基 中附加头孢噻钨纳 300mg／L可将农杆菌基本抑制 ；随着转化植株在含抗生素培养基中继代时间的延长 ，残存农 杆菌的数量和活性逐步下降，在继代 l8个月后 ，无法培养 出 目的菌落 ，但转化植株一旦脱离抗生素环境 ，农杆 菌数量和活性又将得到恢复；残存农杆菌主要分布于植株体表和茎 中，且影响组培苗 PCR检测结果；将转化株 系组培苗移栽到花盆半月和 田间6个月后 ，植株体表 、体内均未检测到 目的农杆菌 ，但在室内培养半个月后 2个 株系根际土壤中检测到 目的菌落。 关 键 词 ：转基 因杨树；农杆菌；残存 中图分类号 ：S722 文献标识码 ：A Analysisonthestatusofagrobacterium translated intopoplarmediatedbyAgrobacterium rhizogenes MIAO Li—ping ，ZHANG Qian—qian ，ZHANG Jun ，YANG Min—sheng ，WANG Lian—rong (1．Collegeofforest，AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071000，China； 2．HortialtureCo llege．HebeiNorthUniversity，Zhangjiakou075131，China) Abstract：Takingpoplar741mediatedbyAgrobacterium rhizogenesasmaterial，an examination wasmadeconcerningthesurvivalofagrobacterium intransgenicplantsduringtheprocessoftrans— plantingandsubculturingonthenutrientmedium．Resultshowsthattheagrobacterium on trans— genicplantcanbecontrolledbasicallywhenthetransgenicplantsculturedinmediumwith300mg／ L ceftiofur；thequantityandactivityofthesurvivalagrobacterium ontransgenicplantwilldeclineas timeprogresses，andwhenthetransgenicplanthasbeencultured18months，theagrobacterium on transgenicplantcannotbeculturedon YEB medium ；whiletheagrobacterium on transgenicplant willresumewhenthetransgenicplantculturedinmedium withoutceftiofur；thetransgenicplants allhavethesurvivalagrobacterium ，whichdistributetransgenicplantsurfaceandstem insideandef— fecttheresultofPCR