转基因食品的论文转基因玉米论文.pdfVIP

农业生物技术学报，2010 年，第 18 卷，第6 期，第1208~1214 页 Journal of Agricultural Biotechnology, 2010, Vol.18, No.6, 1208~1214 技术改进 Updated Technology 转基因玉米MON88017 转化事件特异性定性PCR 检测方法及其标准化 1，2 1 1 1 1* 瞿勇 武玉花 吴刚 曹应龙 卢长明 1 中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料作物生物学重点开放实验室，武汉430062 ；2 江西农业大学农学院，南昌330045 * 通讯作者, cmlu@oilcrops.cn 摘 要 转基因玉米 (Zea mays) MON88017 是美国孟山都公司通过DNA 重组技术开发的具有抗玉米根叶 甲虫(Diabrotica virgifera)和抗草甘膦类除草剂特性的玉米品系, 本研究的目的是建立该品系的转化事件特异 性定性检测方法的标准。根据转基因玉米MON88017 的旁侧序列信息，在左边界的结合位点处设计一系列 引物组合，在筛选出最佳引物组合后，优化了该引物组合的反应体系，建立了转基因玉米MON88017 转化事 件特异性定性PCR 检测方法。全国7 家实验室的验证结果表明，该方法能够特异性检测样品中MON88017 转化事件，检测灵敏度均达到0.10% 以上，且检测结果具有良好的可重复性、可重现性。本方法符合标准检测 特异性强、灵敏度高、重复性好的要求，为我国抗虫耐除草剂玉米MON88017 检测和转基因生物安全管理制 度的实施提供了相应的技术支撑。 关键词 转基因玉米，MON88017 ，左边界，旁侧序列，定性PCR ，循环验证 Event-specific PCR Detection Method of Transgenic Maize Line MON88017 and Its Standardization Qu Yong1,2 Wu Yuhua1 Wu Gang1 Cao Yinglong1 Lu Changming1* 1 Oilcrops Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory of Oil Crop Biology, Ministry of Agriculture,Wuhan 430062, China ；2 College of Agronomy, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China * Corresponding author, cmlu@oilcrops.cn DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.027 Abstract Genetically modified corn (Zea mays) MON88017 is developed by U.S. Monsanto Company through recombinant DNA technology, which is characterized by resistances to maize beetles (Diabrotica virgifera) and to glyphosate herbicide. The purpose of this study is to develop and standardize the event-specific qualitative detection method of this line in China. Based on the information of the flanking sequences GM maize MON88017, a series of primer combinations were designed in the left margin of the binding site. The best primer pair was selected and the reaction system was optimized with the best primer pair. The maize MON88017 events-specific qualitative PCR detection method was establ