27与其受体对肺成纤维细胞增殖与转化的影响IL-27.PDF

J South Med Univ, 2015, 35(10): 1411-1416 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2015.10.09 ·1411 · 基础研究 IL-IL-2727 及其受及其受体对肺成纤维细胞增殖及转化的影响体对肺成纤维细胞增殖及转化的影响 1 2 1 1 1 1 董昭兴 ，邰文琳 ，雷 雯 ，王 颖 ，李振坤 ，张 涛 1 2 昆明医科大学第二附属医院 呼吸内科一病区，检验科，云南 昆明 650101 摘要：目的探讨IL-27 及其受体（WSX- 1）对TGF-β1诱导的小鼠肺成纤维细胞增殖、转化及胶原合成作用。方法 构建IL-27R/ pCDNA3.1过表达载体。实验分为6 个组：正常组，TGF-β1组，IL-27 组，IL-27 受体组，IL-27+IL-27 受体组，TGF-β1+IL-27+ IL-27 受体组。光学显微镜下观察细胞的生长状况，用MTT 检测各处理组对肺成纤维细胞增殖的影响。RT-PCR 和Western blotting 检测肌成纤维细胞标志物a-SMA 以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达，并用免疫荧光检测a-SMA 蛋白的定位及表达情况。结果 （1）IL-27 和IL-27R 都可以抑制肺成纤维细胞增殖；（2）TGF-β1促进肺成纤维细胞表达α-SMA 增加，并促进肺成纤维细胞 Ⅰ和 Ⅲ型胶原合成；（3）IL-27 及其受体可以抑制肺成纤维细胞α-SMA 的表达，并减少肺成纤维细胞I 和III 型胶原的合成；（4）IL-27/ IL-27R 共同作用时，对肺成纤维细胞增殖转化没有影响。结论IL-27 或IL-27 受体可以抑制TGF-β1诱导的小鼠肺纤维化细胞增 殖、转化和胶原的合成作用，但是IL-27 与IL-27 受体共同存在的情况下却不能发挥抑制作用，这可能是由于外源性的IL-27 与 IL-27受体的中和作用不能激活细胞相关信号。 关键词：白细胞介素27 受体；增殖；转化；肺成纤维细胞；胶原合成 Effects of interleukin-27 and its receptor on TGF-β-induced murine pulmonary fibro- 1 blast proliferation and transformation 1 2 1 1 1 1 DONG Zhaoxing , TAI Wenling , LEI Wen , WANG Yin , LI Zhengkun , ZHANG Tao 1Department of Respiratory Medicine, 2Department of Clinical Laboratory, Second Affiliated Hospital of Kunming Medical University, Kunming 650101, China Abstract: Objective To investigate the effects of interleukin-27 (IL-27) and its receptor (WSX-1) on the proliferation, transformation and collagen synthesis of the mouse lung fibroblasts. Methods Cultured mouse lung fibroblasts were treated with TGF-β1, recombinant murine IL-27, a IL-27 receptor (IL-27R) overexpression vector IL-27R/pCDNA3.1, IL-27 and IL-27R, or all the 3 combined. MTT