猪繁殖及呼吸综合征病毒侵入及释放依赖细胞膜胆固醇.PDF

中国科学: 生命科学 2011 年 第41 卷 第11 期: 1079 ~ 1085 SCIENTIA SINICA Vitae SCIENCE CHINA PRESS 论 文 猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入和释放依赖细胞 膜胆固醇 ①② ①② ①② ①② ①② ①② ①②* 孙颖 , 肖少波 , 王荡 , 罗锐 , 李彬 , 陈焕春 , 方六荣 ① 华中农业大学生命科学技术学院, 农业微生物学国家重点实验室, 武汉 430070; ② 华中农业大学动物医学院动物病毒学实验室, 武汉 430070 * 联系人, E-mail: fanglr@ 收稿日期: 2010-12-23; 接受日期: 2011-05-27 国家自然科学基金(批准号:和国家重点基础研究发展计划(批准号: 2005CB523200)资助项目 摘要 胆固醇是细胞膜脂质的重要组成成分. 目前的研究发现细胞膜胆固醇在病毒 关键词 的感染中扮演十分重要的作用. 本研究对细胞膜胆固醇在猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 胆固醇 (PRRSV)感染 MARC-145 细胞中的作用进行了探讨. 通过 TCID50 检测和 Real-Time 病毒侵入 RT-PCR 分析发现, 用胆固醇萃取剂甲基-β-环糊精预处理消除细胞膜胆固醇可显著抑 释放 制PRRSV 的感染, 并呈剂量依赖性; 而补充外源性胆固醇后可部分恢复PRRSV 的感 染性, 提示 PRRSV 感染能力的下降确实是由于细胞膜胆固醇的去除而导致的. 进一步 的研究证实, 细胞膜胆固醇的去除对PRRSV 感染性的影响主要是通过影响PRRSV 的 侵入和释放过程. 上述结果表明, 细胞膜胆固醇是影响PRRSV 感染的一个重要因子. 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and 酰肝素和唾液酸黏附素等细胞表面分子, 这些表面 respiratory syndrome, PRRS) 是严重危害全球养猪业 分子在PRRSV 的吸附和内化中起重要作用[11~13]. 另 的病毒性传染病, 主要导致妊娠母猪的繁殖障碍和 外, 猴波形蛋白和 CD151 也被认为在 PRRSV 感染 仔猪的呼吸系统疾病[1~3]. 该病是由猪繁殖与呼吸综 MARC-145 细胞中具有重要作用[14,15]. 但是, 对 合征病毒(PRRSV)引起的. PRRSV 是单股正链 RNA PRRSV 感染过程的分子细节目前研究的较少. 病毒, 与鼠乳酸脱氢酶增高症病毒(lactate dehydro- 包膜病毒感染细胞通常依赖于宿主细胞膜中的 genase-elevating virus, LDV), 马动脉炎病毒(equine 脂质成分, 如甲病毒属的西门利克森林病毒的感染 arteritis virus, EAV) 和猴出血热病毒(simian hemo- 需要胆固醇和鞘脂的参与[16,17]. 另外, 某些反转录病 rrhagic fever virus, SHFV) 同属动脉炎病毒科动脉炎病 毒和丝状病毒的侵入和组装依赖于细胞膜上富含胆 毒属[4]. 在体内PRRSV 主要感染单核细胞和巨噬细胞, 固醇的微结构域[18,19]. 胆固醇是真核细胞胞膜上的 在体外猪肺泡巨噬细胞和来源于非洲绿猴肾细胞的 一种重要组分, 具有一定的硬度和疏水性, 可在胞膜 MARC-145 是其敏感细胞[5~8]. 以前的