人类肿瘤抗原的鉴定与应用进展.PDF

维普资讯 匿堂 芏 生 旦箜 鲞箜 塑 苎IIMedSciOncolSect，Oct。b。2005．Vo1．32．N 10 人类肿瘤抗原的鉴定及应用进展 孙硕综述 李官成审校 摘要 人类肿瘤抗原的鉴定是肿瘤免疫研究中极其重要的一环，T细胞识别的肿瘤抗原以 各种分子生物学和免疫学方法被鉴定，包括CTL筛选法 、血清学鉴定重组cDNA表达文库(SER— Ex)法、组合肽库技术及多种系统性基因分析法。通过对肿瘤抗原的鉴定 ，可更好地了解抗原 的本质、抗肿瘤免疫反应过程和免疫逃逸机制，对促进和发展肿瘤免疫治疗，发现肿瘤标记物具 有重要意义。 关键词 抗原，肿瘤 ；免疫疗法 中图分类号 R730．3 文献标识码 A 文章编号 1000—8225(2005)10．0723。04 肿瘤抗原的鉴定在肿瘤诊断和治疗的发展中扮 合的肿瘤抗原进行酸洗脱，然后用高效液相色谱分 演重要角色，癌症患者的成功治愈需要免疫系统识 离纯化得到若干多肽。分别将这些多肽进行肽结合 别肿瘤特异抗原，所以鉴定肿瘤抗原及诱导 自体的 实验和 CTL介导的细胞毒性实验 ，筛选出合适的抗 免疫反应是 目前肿瘤免疫研究的主要 目标。20世 原多肽 。该法的优点在于可直接鉴定天然抗原，可 纪90年代以来多种抗原鉴定方法的出现，使得这一 定量分析抗原肽在瘤组织中的分布，但是实验仪器 领域的研究取得重要进展。现综述人类肿瘤抗原的 要求水平高，技术难度较大，至今仅有少数实验室用 鉴定及肿瘤抗原在临床应用等方面的重要进展。 本法鉴定出肿瘤抗原肽 。 1 肿瘤抗原的鉴定 1．2 血清学鉴定重组cDNA表达文库技术 1．1 CTL筛选法和多肽洗脱法 由于以上两种方法运用的局限性，人们试 图用 由于T细胞识别的肿瘤抗原在抗肿瘤免疫反 血清学方法来筛选肿瘤抗原。1995年血清学鉴定 应中起重要作用，90年代发展了一种在体外用特异 重组 cDNA表达文库(serologicalanalysisofrecombi— 性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)克隆筛选相应人类肿瘤 nantcDNAexpressionlibrarires，SEREX)技术出现， 1 述 抗原的方法，鉴定了第一个T细胞识别的人类肿瘤 其基本步骤为从患者肿瘤组织中提取mRNA建立 抗原 MAGE．1。之后应用此方法鉴定的抗原有： cDNA表达文库，用去除了干扰抗体的患者血清进 MAGE一2 MAGE一3 MAGE一12 BAGE GAGE NY— 行筛选，鉴定 阳性克 隆并分析其表达。应用 ESO．1等CT(cancer．testis)抗原；MART一1、P91一A、 SEREX技术 已在多种肿瘤组织中发现约4000种 Melane．1等黑色素分化抗 原；p16 、B．catenin、 抗原基因，Ludwig癌症研究所牵头组建了SEREX CDC27、MUM．1、Caspase．8等基因突变抗原；HER一 技术合作组，并建立 了相应 的 SEREX数据库 2、G250、p53等过表达抗原。CTL筛选法虽然较为 (WVcqq．1icr．org)。 成熟且可直接鉴定CTL识别的肿瘤抗原，但 由于该 目前 SEREX技术已从纯粹的自体肿瘤 cDNA 法要求在体外建立自体的CTL克隆和瘤细胞株，而 文库筛选发展到睾丸 cDNA文库的筛选…、异体血 上皮系统恶性肿瘤 同时具备上述条件的概率很少， 清筛选 、细胞系文库筛选和用单抗代替血清进行筛 所以该法仅限于分析黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌等 选 ]。如Ueda等 用神经胶质瘤患者的血清筛选 少数易于在体外建株的肿瘤类型。 人类睾丸cDNA文库，得到一个抗原 SOX6，它是一 多肽洗脱法 (peptideelutionapproach)是建立在 个转录因子，异常表达于神经胶质瘤，并可被神经胶 生物化学方法基础上