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六 展望 残留检测先用快速检测产品进行筛查,可疑阳性样品再用色质联用检测方法加以确证是主线 快速检测技术实现在线化、并行化,目前主导产品是试剂盒和试纸条,试纸条是发展方向,传感器和芯片技术也许是未来的主流技术 半抗原设计信息丰富化 抗体的特性呈现灵敏化、广谱化,种类呈现多样化、微型化 近期多抗和单抗依然占主导地位,长远来看,新型抗体必将取代传统抗体 中心简介 国家重点学科基础兽医学 国家兽药残留基准实验室 国家兽药安全评价中心 国家兽药安全评价(环境评估)实验室 农业部兽药安全监督检验测试中心(北京) 中国农业大学“211工程”农产品安全研究中心 “985工程”农产品加工与食品安全创新平台 农业部兽用化药和中草药创制与评价重点开放实验室 产业化基地北京维德维康生物技术有限公司 一、研究平台 实验动物房 国家兽药安全评价中心 目前拥有3500平方米实验室和560平方米取得资质的实验动物房,以及飞行时间质谱仪、高分辨液质仪、超高效液相色谱仪、流式细胞仪等仪器设备,价值超过3500万元。 二、研究方向 兽药残留检测技术(包括快速检测产品研发) 分子毒理学 动物及动物性食品中病原生物耐药性产生与扩散及风险评估 兽药环境生态毒理学 新兽药创制 四、主要研究成果 近五年先后承担十一五国家科技支撑计划、十五国家科技攻关项目、国家杰出青年基金项目、国家自然科学基金重点项目等30余项,总经费超过5000万元。在国内外重要学术刊物上发表论文170余篇,其中SCI收录115篇;制定国家和行业兽药残留检测方法标准70项:研发出具有自主知识产权药物残留检测试剂盒和试纸条产品31种,其中16种获得农业部批准备案文号;申报国家发明专利44项,其中已获国家发明专利20项。研究成果获得国家科学技术进步二等奖1项,北京市科学技术一等奖1项和北京市科学技术二等奖2项。已培养博士研究生36名,硕士研究生142名。 谢 谢大家! 玉米赤霉醇类药物的结构信息 Z H Wang, J Z Shen. 2009. Journal of Molecular Recognition, submitted. 疏水性 体积 偶极距 分子距离 电量 相关系数 获得的分子结构信息,已用于半抗原的合理设计 单 克 隆 抗 体 制 备 过 程 脾细胞 杂交瘤细胞 基因重组抗体制备 噬菌体展示抗体库淘选策略 scFv 双特异性单链抗体制备策略 ScFv 1 Linker ScFv 2 Bispesific scFv Broad-specificity antibody pCANTAB 5E-bispesific scFv 磺胺类 喹诺酮类 识别磺胺类 和喹诺酮类 抗体评价及指导抗体定向改造 CoMFA 初步测定 抗体特性 3D-QSAR 重组抗体 Docking 获取兽药-抗体互作主要力场 预测抗体 三维结构 互作模型 重组抗体定向改造 同源模拟 获取兽药-抗体互作结构信息 推测兽药-抗体间发生作用的 氨基酸性质 推测兽药-抗体间发生作用的 氨基酸位点 ELISA 受体抗体(Acceptor) UniSenesor公司研发了基于受体的可同时检测13种青霉素和四环素两类药物的试纸条产品中国农大和北京维德维康公司合作研发可同时检测15种青霉素和头孢类药物的试纸条产品 受体作为特异性识别的生物大分子,因其分离纯化及体外构建均较复杂,应用于免疫分析的报道很少 Twin Sensor BT 放射性受体分析法 1978年美国波士顿大学教授Charm发明 受体分析法 C H A R M I 是专用于牛奶中β一内酰胺抗生素残留 检测方法, 也是美国 A O A C承认的第一个快速测定 法, 这个方法非常快速和灵敏,一个奶牛样品分析 只需 1 5分钟时间 目前,CHARM被多国政府的农业部和卫生部采用作为的标准方法 如我国: 四环素类(SN/T 2309-2009),β-内酰胺类(GB/T 21174-2007),磺胺类(GB/T 21173-2007) 细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而引起生物学效应的特殊蛋白质 微孔板检测系统 基于膜的检测系统 表面等离子共振传感器 侧流层析技术 免疫渗滤技术 荧光分析系统 CHARM原理 受体分析法的优势:可以检测同一类抗生素 难点:受体的制备 检测方法的应用 目的基因的调取 目的蛋白活性鉴定 目的蛋白的表达及纯化 表达载体的构建 基于受体的快速 检测方法建立 检测方法的优化 青霉素等β-内酰胺类抗生素通过与细菌膜蛋白结合,抑制细菌细胞壁的
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