酚氧化酶活力测定方法中关于测定时间的研究.pdfVIP

第 18卷第6期 上 海 海 洋 大 学 学 报 Vo1．18．No．6 2009年 11月 JOURNALOFSHANGHAIOCEAN UNIVERSITY Nov．，2009 文章编号：1674—5566(2009)06—0765—06 · 研究简报 · 酚氧化酶活力测定方法 中 关于测定时间的研究 王建国，陆宏达 (上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306) 摘 要：以克氏原螫虾 (Procambarusclarkii)血清酚氧化酶为材料，采用 Ashida的分光光度法测定了不同活力 酚氧化酶与L—DOPA在60min内每2min生成物的吸光度以及计算了不同时间的酚氧化酶活力。结果显示， 当测定时间为60min时，随着酚氧化酶活力升高，吸光度与测定时间的直线相关系数逐渐降低，反映了测定 的酚氧化酶活力准确性也越差，与其他已报道的南美 白对虾 (Penaeusvannamei)、中国对虾 (Penaeuschinesis) 和中华绒螯蟹 (Eriocheirsincnsis)等虾蟹类及昆虫 (Pierisrapae)的酚氧化酶活力测定结果相似。与6min时的 相关系数和酶活力计算结果相比，当测定时间长于 12min时相关系数显著变小(P0．05)，而短于6min时 也有变小的趋势；当测定时间长于 10min时酚氧化酶活力计算结果显著变小 (P 0．05)。通过不同测定时 长的相关系数以及酚氧化酶活力计算结果的差异性比较 ，得出酚氧化酶活力测定最为准确的测定时长 (t)为 6rain≤t10min，最佳时长为 6min。 关键词：克氏原螯虾；酚氧化酶；测定时间 中图分类号：S917 文献标识码 ：A Thesuitabletimein themeasurementofphenoloxidaseactivity WANGJian—guo，LU Hong—da (CollegeofFisheriesandLifeScience，ShanghaiOceanUniversity，Shanghai201306，China) Abstract：Theabsorbancyafterthereaction betweentheserum phenoloxidaseofprocambaruzclarkiiandL- DOPA wasmeasuredbyAshidaSspectrophotometryper2minutesand theresuItsofphenoloxidaseactivity werecalculatedatdifferenttimein60minutes．Theresultsshowedthatwhen thephenoloxidaseactivitywas higher，thelinearrelationshipbetween absorbancyandtimewasgraduallypoorerasmeasuringtimewas60 minutes，whichindicated thatthemeasured resultsofphenoloxidase activitywerenotaccurateand reliable． Thisphenomenon wasthesameastheresultsin previousreportsofPenaeusvannamei，Penaeuschinesis， EriocheirsinensisandPierisrapae．Compared tothelinearrelationshipand calculatedresultsasmeasuring timewas6mi。nutes，thelinearrelationshiploweredsignificantly。asmeasuringtimewaslongerthan12minutes andtheli