酵母生产麦角固醇流加培养过程的优化.pdfVIP

第 28 卷 第 2 期 北 京 化 工 大 学 学 报 Vol. 28 , No. 2 2001 年 JOURNAL OF BEIJ IN G UN IV ERSIT Y OF CHEMICAL TECHNOLO GY 2001 酵母生产麦角固醇流加培养过程的优化 史新元 　戚以政 　谭天伟 (北京化工大学化学工程学院 , 北京 　100029) 摘 　要 : 对酿酒酵母生产麦角固醇的流加培养过程进行了研究 ,提出了以比生长速率为控制参数的流加方案 ,并以 生物量、麦角固醇比生产速率、麦角固醇含量等因素为依据确定了该发酵体系的最优培养参数。在最优方案下 ,生 ( ) 物量可达 42 g/ L ,麦角固醇含量达 326 g 每 100 g 干菌体中 。 关键词 : 酵母 ; 麦角固醇 ; 比生长速率; 比生成速率 中图分类号: TQ 9201 　　麦角固醇是甾族化合物中的一种甾醇 ,它是合 24 h得种子液。按 10 %的比例将种子液转入 20 L 成维生素D2 的前体 ,在医药和保健食品中有重要用 发酵罐 ,发酵条件为 :30 ℃,250～450 r/ min ,通气量 途。目前国内外多采用酵母发酵法生产麦角固 25 L/ min ,p H 5 5 。发酵一定时间后使用蠕动泵将 醇[1 ,2 ] 。国内外对麦角固醇的研究很多 ,主要集中 料液补入发酵罐。补料结束后继续发酵 ,直至溶氧 于菌种、培养基、发酵条件等方面[3～6 ] 。实际上 , 由 开始上升 ,终止发酵。 于麦角固醇为胞内产物 ,其含量随菌种和培养条件 14 　分析方法 的不同而不同 ,因而生产过程控制应当以高生物量 14 1 　生物量的测定 　取一定发酵液 ,在离心机上 和高含量相统一为目标。本研究在优化了发酵操作 以5 000 r/ min 离心 20 min ,所得菌体在 80 ℃下烘 条件的基础上 ,对酵母流加培养过程中最优控制参 干至恒重。 数进行了研究 ,确定了以比生长速率为控制参数的 14 2 　麦角固醇的分析 　精确称取 01～02 g 干 流加培养方案。这一方案可实现酵母发酵生产麦角 菌体置于 100 mL 容量瓶中 ,加醇碱溶液 32 mL ,用 固醇培养过程高生物量和高含量的统一。 塑料薄膜封口。在 85～90 ℃水浴中皂化 3 h , 中途 取出振荡 2～3 次。冷却后加蒸馏水 8 mL ,石油醚 1 　材料与方法 20 mL ,加瓶塞摇 30 s ,静置 30 min ,分层后 ,移取上 1 . 1 　菌种 层石油醚 ,在波长 280 nm 处测吸光度值[7 ] ,参照同 ( ) 样波长下所作标准曲线 ,可知麦角固醇浓度。 酿酒酵母 S accharomyces cerevisiae ZE41 , 中 科院微生物研究所提供。 14 3 　残糖浓度的分析 　采用 3 ,5二硝基水杨酸 1 . 2 　培养基 法[8 ] 。 种子培养基 :葡萄糖 20 g/ L ,酵母粉 10 g/ L ,蛋 2 　结果与讨论 白胨