第七讲、酵母基因工程.pdf

酵母基因工程酵母基因工程酵母基因工程酵母基因工程 AAAA 酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征 BB 酵母菌的宿主系统酵母菌的宿主系统 CC 酵母菌的载体系统酵母菌的载体系统 DD 酵母菌的转化系统酵母菌的转化系统 EEEE 酵母菌的表达系统酵母菌的表达系统酵母菌的表达系统酵母菌的表达系统 FFFF 利用重组利用重组利用重组利用重组酵母生产乙肝疫苗酵母生产乙肝疫苗酵母生产乙肝疫苗酵母生产乙肝疫苗 AA 酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征 酵母菌的分类学特征酵母菌的分类学特征 酵母菌（酵母菌（YeastYeast ）是一群以）是一群以芽殖芽殖或或裂殖裂殖方式进行方式进行无性繁殖无性繁殖的单细的单细 胞胞真核生物真核生物，分属于，分属于子囊菌纲子囊菌纲 （子囊酵母菌）、（子囊酵母菌）、担子菌纲担子菌纲 （担子酵母（担子酵母 菌菌菌菌））））、、半知菌类半知菌类半知菌类半知菌类 （（（（半知酵母菌半知酵母菌半知酵母菌半知酵母菌）））），，共由共由共由共属和个属和个属和个属和500500500500多个种组成多个种组成多个种组成多个种组成。。如如如如 果说大肠杆菌是外源基因最成熟的原果说大肠杆菌是外源基因最成熟的原核核核核生物表达系统，则酵母菌是最生物表达系统，则酵母菌是最 成熟的真核生物表达系统。成熟的真核生物表达系统。 AA 酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征酵母菌作为表达外源基因受体菌的特征 酵母菌表达外源基因的优势酵母菌表达外源基因的优势 全基因组测序，基因表达调控机理比较清楚，遗传操作简便全基因组测序，基因表达调控机理比较清楚，遗传操作简便 具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统 大规模发酵历史悠久、技术成熟、工艺简单、成本低廉大规模发酵历史悠久、技术成熟、工艺简单、成本低廉 能将外源基因表达产物分泌至培养基中能将外源基因表达产物分泌至培养基中 不含有特异性的病毒不含有特异性的病毒不含有特异性的病毒不含有特异性的病毒、、、、不产内毒素不产内毒素不产内毒素不产内毒素，，，，美国美国美国美国FDAFDAFDAFDA认定为安全的认定为安全的认定为安全的认定为安全的 基因工程受体系统（基因工程受体系统（Generally Recognized As SafeGenerally Recognized As Safe GRASGRAS ）） 酵母菌是最酵母菌是最简单简单简单简单的真的真核核核核模式生物模式生物 BB 酵母菌的宿主系统酵母菌的宿主系统 广泛用于外源基因表达的酵母宿主菌广泛用于外源基因表达的酵母宿主菌 提高重组蛋白表达产率的突变宿主菌提高重组蛋白表达产率的突变宿主菌 抑制超糖基化作用的突变宿主菌抑制超糖基化作用的突变宿主菌 减少泛素依赖型蛋白降解作用的突变宿主菌减少泛素依赖型蛋白降解作用的突变宿主菌 广泛用广泛用广泛用广泛用于外于外源源源源基基因表因表因表因表达达的酵母宿的酵母宿的酵母宿的酵母宿主主菌菌菌菌 目前已广泛用于外源基因表达和研究的酵母菌包括：目前已广泛用于外源基因表达和研究的酵母菌包括： 酵母属酵母属 如如酿酒酵母酿酒酵母 （（Saccharomyces cerevisiaeSaccharomyces cerevisiae）） 克鲁维酵母属克鲁维酵母属 如如乳酸克鲁维酵母乳酸克鲁维酵母 （（KluyveromycesKluyveromyces lactislactis ）） 毕赤酵母属毕赤酵母属毕赤酵母属毕赤酵母属 如如如如巴斯德毕赤酵母巴斯德毕赤酵母巴斯德毕赤酵母巴斯德毕赤酵母 （（（（PichiaPichiaPichiaPichia pastorispastorispastorispastoris ）））） 裂殖酵母属裂殖酵母属 如如非洲酒裂殖酵母非洲酒裂殖酵母 （（Schizosaccharomyces pombeSchizosaccharomyces pombe）） 汉逊酵母属汉逊酵母属 如如多态汉逊酵母多态汉逊酵母 （（Hanse