HD-8阳离子交换树脂纯化灰树花多糖及其抗氧化活性的研究.pdf

第 3O卷第 4期 徐 州 工 程 学 院 学 报 (自然 科 学 版 ) 2015年 12月 V01．3ONo．4 JournalofXuzhou InstituteofTechnology (NaturalSciencesEdition) Dee．2015 HD一8阳离子交换树脂纯化灰树花多糖 及其抗氧化活性的研究 韩 伟 ，满 宁 (华 东理工大学 药学院 中药现代化工程 中 ，上海 200237) 摘要：以脱蛋 白率、脱色率和多糖保 留率为指标，筛选 出灰树花多糖纯化效果较佳 的阳离子交 换树脂HD一8，并对其纯化工艺进行考察 ，获得优化的工艺条件为：流速 2BV／h(1mL／min)、上样 量400mL(蛋 白质含量为 99．2rag)、上样的量做浓度 0．248mg／mL(多糖提取液 中蛋 白质浓度)， 多糖纯度达 62．66％．与其他工艺相比，采用 HD-8树脂能有效地提高灰树花多糖的纯度且节约成 本、操作高效；同时对灰树花多糖的体外抗氧化活性进行 了评价． 关键词 ：灰树花；多糖；树脂；抗氧化 中图分类号 ：$985．4 文献标志码 ：A 文章编号：1674—358X(2015)04—0018-06 灰树花 (Grifolafrondosa)，又称舞茸、莲花菇 、栗子蘑等 ，属担子菌亚 门，层菌纲，多孔菌科口]，从温带 到亚热带森林均有分布 ，在我国和El本被广泛栽培，是一种好氧喜光的大型木腐真菌．灰树花形态如莲花似 珊瑚，肉质脆嫩 ，鸡丝香味[2]，具有极高的营养价值和多种药理疗效，是近年来热点研究开发的珍奇真菌之 一 ． 灰树花的主要生物活性成分有多糖、多酚、核酸、蛋 白质 、脂类等口]，还富含多种氨基酸 、维生素、矿物质和 有机酸 ，膳食纤维高达 33．7 _4]．其 中灰树花多糖具有抗肿瘤 ，抗 HIV病毒 ，增强免疫功能，调节血压 、血糖 和血脂等生物功能[5]，在医疗和保健方面具有很高的开发利用价值及 良好的应用前景． 多糖的脱蛋白纯化方法一般有 Sevage法、醇沉法 、三氯 乙酸法等_l6]．这些纯化方法存在有机试剂用量 大、操作时间长、效果差等缺点．本文 以灰树花子实体为研究体系，脱蛋白率 、脱色率 、多糖保 留率为指标 ，采 用动态法筛选出纯化效果较佳的HD-8阳离子交换树脂 ，并对其操作工艺参数进行优化 ；最后选用羟 自由基 法-l7对纯化后的灰树花多糖进行体外抗氧化活性评价． 1 实验部分 1．1 实验原料与试剂 灰树花 ，真菌干品，上海市农业科学院；葡萄糖 (标准品95 )，硫酸，苯酚，醋酸 ，抗坏血酸 (VC)，过硫 酸钾 (KSzO)，过氧化氢 (H O。，质量分数3O )，水杨酸，分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司；七水合硫酸 亚铁 (FeSO ·7HzO)和无水乙醇，分析纯 ，国药集 团化学试剂有限公司；考马斯亮蓝 G一250、牛血清蛋 白(标 准品98 )，BR，上海源聚生物科技有限公司；壳聚糖 ，分析纯 ，上海伟康生物制品有限公司． 树脂 ：大孔吸附树脂 HZ803、HZ806、HZ816、HZ820，大孔型离子交换树脂 D202、D301、D001、DK110、 HD一8，凝胶型离子交换树脂 711(201×4)、335、732，选购于上海华震科技有限公司． 1．2 实验仪器 紫外一可见分光光度计 (uV1900PC，上海亚研 电子科技有 限公司)，集热式恒温加热磁力搅拌器 (DF一 101S，巩义市英峪予华仪器厂)，循环水真空泵 (SHB-llI型，巩义市英峪予华仪器厂)，旋转蒸发器 (RE一52C， 上海予华仪器有限公司)，微波炉 (ER一692型，中国电子器件工业总公司)，电子天平 (ALl04，梅特勒托利 多)，超声波清洗器(SK3310HP，上海科导超声仪器有限公司)，台式高速离心机 (RJ—TGL一16C，无锡市瑞江 收稿 日期 ：2015-05—08 基金项 目：国家 自然科学基金项 目；上海市科技兴农重点项 目[泸农科攻字(2012)第2—9号] 作者简介：韩 伟 (1968一)，男，江苏宝应人 ，教授 ，博士 ，博士生导师，主要从事天然产物的提取 、分离及功能研 究．