L-脯氨酸在732阳离子交换树脂上的吸附性能研究.pdf

第37卷第1期 淮~0Jili范大学学报(自然科学版) VO1．37 NO．1 2016年3月 JournalofHuaibeiNormalUniversity(NaturalScience) M ar．2016 L一脯氨酸在732阳离子交换树脂上的吸附性能研究 曹稳根，曹玉瑶，王 志 (宿州学院 生物与食品工程学院，安徽 宿州 234000) 摘 要：通过静态吸附和动态吸附与解吸附试验研究L一脯氨酸在732阳离子交换树脂的最佳吸附条件和影响 因素，为L一脯氨酸在732阳离子交换树脂吸附分离提供科学的实验依据 ．结果表明，静态吸附最佳条件 ：25℃ 时，在L一脯氨酸溶液浓度为5O g／mL、体积为150mL、pH为6的条件下，静态吸附平衡时间为15min，吸附率 为83．61％，无机盐的存在导致吸附率迅速下降．动态吸附与解吸附的最佳条件 ：25cc时，在L一脯氨酸上样液 浓度25Ixg／mL、体积20mL、流速lmL／min、pH为6的条件下，吸附率为82．83％；氨水洗脱浓度1．5mol／L、体积 5OmL、流速3mLm／in、pH为6的条件下，解吸率为92．22％．732阳离子交换树脂对L一脯氨酸具有良好的吸附 性能． 关键词：L一脯氨酸；732阳离子交换树脂；吸附；解吸附 中图分类号：Q517 文献标识码：A 文章编号：2095—0691(2016)01—0062—05 L一脯氨酸(L—proline，简称L—Pro)是含亚氨基的中性氨基酸，是构成蛋白质的20种基本氨基酸之一， 为人体非必需氨基酸．L—Pro具有优 良的生物活性 ，在医药、化工 、农业及食品等方面有着广泛的用途，尤 其在医药上是许多合成新药的中间体，日益受到人们的重视 ¨．L—Pro为两性电解质 ，在不同的pH溶液 中，以不同的离子形式存在．因此可以被阳离子或阴离子交换树脂所吸附，选择适当的条件就可将L—Pro 与其他氨基酸和杂质分离开来 ．发酵液中氨基酸的分离纯化主要采用离子交换法 ]，本文通过静态吸附 和动态吸附与解吸附试验研究L—Pro在 732阳离子交换树脂上吸附性能，旨在为L—Pro在732阳离子交 换树脂吸附分离提供科学的实验依据． 1 买验部分 1．1 仪器与试剂 U3310紫外分光光度计(日立Hitachi公司)；HZQ—X300恒温振荡器 (上海恒科技有限公司)；PHS一 3CT型精密酸度pHfi(上海精贤科技有限公司)． 酸性茚三酮溶液：称取1．25g茚三酮溶于30mL冰乙酸和20mL2mol／L磷酸溶液中，7O℃下加热搅 拌溶解，冷却后置棕色试剂瓶中，4℃保存备用 ；L—Pro标准品(美国sigma公司)；732阳离子交换树脂 (上海谷研试剂有限公司)；其他试剂为分析纯，实验用水为纯水． 1．2 树脂的预处理 先用足量的无水乙醇浸泡732阳离子交换树脂 ，振荡24h后纯水洗至无醇味；接着用2～3倍量的 2mol／LHC1浸泡24h后 ，纯水反复漂洗至中性；再用同样体积2mol／LNaOH浸泡24h后 ，纯水反复漂洗 到中性．最后再用2～3倍量的2mol／LHCI浸泡24h后，用纯水反复漂洗至中性，抽滤烘干后4℃保存 备用 ． 收稿 日期：2015一l1—10 基金项 目：安徽省高校省级自然科学研究重点基金项 目(KJ2012A264)；国家级大学生创新创业训练基金项 目(教高司鬲[2013]8号) 作者简介：曹稳根(1964一 )，男，安徽东至人，教授 ，研究方向：生化分析及天然产物研究． 第1期 曹稳根等：L一脯氨酸在732阳离子交换树脂上的吸附性能研究 63 1．3 L-Pro浓度的测定 准确配制0．1re#mE的L—Pro标准溶液，分别移取 lmL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL置于10mL的 容量瓶中，纯水定容后依次得到浓度为 10~g／mL、20~g／mL、30~glmL、40~g／mL、5Op~g／mL、60~g／mL的 L—Pro溶液 ．接着各取上述不同浓度的L—Pro溶液2mL于6支比色管中，依次加入2mL酸性茚三酮溶液 和2mL冰醋酸，摇匀后沸水浴加热40min．冷却后纯水定容至10mL_以纯水为参比，于波长515nm