Rho鸟苷交换因子12（ARHGEF12）基因在白血病细胞生长中的作用研究.pdf

第46卷第6期 温 州 医 科 大 学 学 报 VO1．46NO6 2016年6月 JournalofWenzhouM edicalUniversity Jun．20l6 甥 Rho鸟苷交换因子12(ARHGEF12)基因在 白血病细胞 生长中的作用研究 高莉，解杨阳，王翔，汤燕静，汤静燕，陈静，沈树红 (上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 血液／肿瘤科 ，上海 200127) [摘 要] 目的：探讨Rho鸟苷交换因子12(ARHGEF12)基因对白血病细胞生长的作用及作用机制。方法： 通过实时荧光定量PCR(RT．PCR)对选定的U937、KGla、ML2、Kasumi．1、THP1白血病细胞株进行ARHGEFI2基 因表达的检测，并用shRNA分别在高表达及低表达的白血病细胞株中敲低ARHGEF12，通过流式细胞术分析 细胞的生长及凋亡情况，最后进行蛋白激酶芯片分析以发现相关作用机制。结果：部分白血病细胞株高表 达ARHGEF12基因，在高表达的细胞中敲低ARHGEFI2基因会使细胞生长受抑制，这与敲低后细胞凋亡增加、 增殖抑制相关，并且和p53、CDK2及p27Kipl磷酸化相关。结论：ARHGEF12对其高表达的白血病细胞的生 长是必须的，敲低ARHGEF12基因导致 白血病细胞凋亡增加、增殖抑制。 [关键词]ARHGEF12基因；白血病细胞；凋亡 [中图分类号] R733．7 [文献标志码] A DOI：10．3969~．issn．2095—9400．2016．06．006 TheroleofRhoguaninenucleotideexchangefactor12(ARHGEF12)inleukemiacellgrowth GA0Li, XIEYangyang,WANGXiang,TANGYanjing,TANGJingyan，CHENJing,SHENShuhong．DepartmentofHe— matologyandOncology,ShanghaiChildren MedicalCenter,SchoolofMedicine,ShanghaiJiaotongUniversity, ShanghaL200127 墨圈墨一 Objective：Toassesstheeffect。fARHGEF12onleukemiace11growthandtheunderlying mechanism．Methods：ARHGEF12expressionwasdeterminedbyquantitativeRT-PCR inseveralleukemiacell lines．Knock-downofLARG wasperformedwithshRNAsinleukemiacelllinesandtheflow cytometryanaly— sis(FACS)wasusedtodetectthegrowthandapoptosisoftheleukemiacellsafterLARG silencing．Antibody assayscreenofkinasephosphorylationwasdonetoexplorethepotentialmechanism．Results：Knockingdown ARHGEF12inhighexpressioncellswouldinhibitcellgrowth，whichresultedfrom increasedapoptosisandde· creasedproliferation．Phosphorylationofp53，CDK2andp27Kip1wereinvolvedinthisprocess．Conclusion： ARHGEF12isessentialforthergowthofleuk emiacells，withhighexpressionofARHGEF12，downregulation ofARHGEF12wouldcauseincreasedcellapoptosisandinhibitedcellproliferationaswel1． 墨圈衄 ARHGEF12；leukemiacell；apoptosis