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黄芪提取物的抗凋亡法抑制破坏胃癌细胞和皮细胞 狄娜，刘福楠，苗志峰，杜宗敏，徐惠敏 人体腹膜间皮细胞线HMrSV5上清液MKN45)和黄芪共同显微镜形态学变化MTT法细胞细胞凋亡透射电子显微镜吖啶橙染色溴化乙锭 (AO/EB)量化显微镜凝聚核表达Bcl-2和Bax评价染色胃癌肝癌细胞上清液培养HMrSV5细胞胃癌细胞MKN45细胞上清液HMrSV5细胞凋亡细胞明显的形态如染色质浓缩核碎裂和凋亡小体。黄芪可以部分抑制这些变化和规范Bcl-2和Bax在HMrSV5细胞表达胃癌细胞通过对上清液诱导HPMCs凋亡。黄芪抑制这种现象，peutic剂可用于辅助化疗治疗胃癌。腹膜是人胃癌和其手术治疗成功的一个最重要的因素它出现在胃癌终末期。然而，该倾向转移的机制基本尚未明确理解。 腹膜癌病可以被视为一系列喷口，形成了一个腹膜转移级联。腹膜间组织似乎是一个友好的东道主肿瘤扩散提供了丰富的生长因子和趋化因子参与了肿瘤转移。目前，我们分子调解的理解据报道，皮细胞癌症的入侵和接受变化的癌症细胞释放的因素。肿瘤细胞入侵单层，皮细胞必须透皮单层。巴克等人都证明了皮大鼠保护作用模型。当沃克256肿瘤细胞快速植入注入大鼠腹腔，腹膜顶叶已被剥 在裸露其皮衬里完整离开基底膜然而，在联合国大鼠腹腔的皮是一件罕见的事。调查结果显示，胃癌细胞粘附腹膜间皮细胞半球形，脱落，且结缔组织暴露到腹腔。入侵皮单层似乎出现了肿瘤诱导的皮细胞凋亡。在这项研究中，我们审查胃癌细胞释放因素腹膜皮细胞凋亡的影响。 黄芪是一个传统的中药用于治疗普通感冒腹泻，疲劳，食欲不振和心脏疾病。它已被用作免疫缺陷性疾病一种免疫治疗调节剂，以减轻化疗药物的不利影响，如抑制减少骨髓癌症患者。黄芪包括各种多糖，皂甙以及L-精氨酸或L-刀豆。此外，研究还表明，黄芪多糖大肠癌，乳腺癌肿瘤，泌尿系统肿瘤，胃癌等。近年来，有人建议，黄芪可能腹膜间皮细胞抗凋亡。尽管这样，黄芪皂甙提取物对人腹膜间皮细胞腹膜在抗凋亡尚未广泛的研究。本研究旨在观察黄芪皂甙提取物对人类腹膜中间上皮细胞在腹膜胃癌肿瘤转移反细胞凋亡的影响。相差显微镜日本尼康，荧光显微镜日本，奥林巴斯，透射电子显微镜日本，日立氢6001，低术仪流式细胞仪美国黄芪注射液青春宝制药有限公司北3-(4,5–dimethylthiazol -2-基-2, 5-二苯基tetrazoliumbromideMTT法和吖啶橙/溴化敖/电子束获得了由蓝美国。碘化PI)的，获得Bioshar美国。Bcl- 2和Bax和肌动蛋白抗体小学，以及第二抗体羊抗鼠IgG ，获得来自Santa Cruz生物技术公司CA，美国。杜尔贝科的修改鹰的介质液和小牛血清FCS)的 获得了由法转化细胞格兰德艾兰，纽约， 美国。其他实验室试剂获得了六西格玛美国。人腹膜间皮细胞系HMrSV5是彭佑铭教授热心提供，中南大学第二医院长沙，中国皮埃尔龙科教授，榫医院巴黎，法国。人胃癌细胞转移肝脏细胞线， MKN-45和正常胃粘膜上皮细胞系后GES-1获得了由中国北京癌症研究所研究。细胞置于75厘米组织培养瓶和在37增长根据加湿大气中含有50毫升/ L的CO2和950毫升/升的空气在培养液辅以10 ％胎牛血FCS)，100U/ml的青霉素和100μg/ml的链霉素2mmol/L的L-谷氨酰胺20mmol/L的羟乙基乙哌嗪酸复。细胞脱落改为每两天或三天使用0.25％胰蛋白酶和0.02 mol/L的乙二胺四乙酸中等磷酸缓冲液。 胃癌细胞或正常胃粘膜上皮细胞制备无血清培养基}[1]。首先将5.0× 10细胞10毫升培养液培养100毫米组织10 ％ FCS37 ℃条件下培养3天。如果要取得蛋白液，磷酸盐缓冲液洗涤细胞两次，然后3毫升无血清DMEM培养液培养2。无血清培养基在1000 ×克离心洗脱5分钟，孔径0.45微米存放于-20直到使用。 人腹膜间皮细胞系HMrSV5在50厘米含有10％FCS的DMEM培养液培养。无血清培养液胃癌细胞系MKN45无血清培养基胃癌癌细胞MKN45无血清培养基+200μg/ml的黄芪注射液培养液+200μg/ml的黄芪注射液。皮细胞方案的2424小时PBS轻轻洗涤，然后显微镜大小，形状，和完整的细胞膜，细胞质和细胞核。 未经处理的间皮细胞的蛋白液图1A发现个多边形鹅卵石，但皮细胞蛋白无血清培养基形态学发生变化去角质和区图1皮细胞的形态变化最明显。黄芪注射液可部分制止这种形态学改变图1C。MKN45治疗二十四小时后，通过电子显微镜凋亡功能如凝结核染色，起皱的核膜，扩张内质网，和相对正常的结构线粒体是veriied图2。透射电镜下，细胞核膜完整，染色质集中到边界膜或形成拱图2C。也观察萌芽形成和凋亡现象图。凋亡的胃癌细胞内无血清培养基和黄芪注射液抗凋亡的共同信号通。无血清培养基和黄芪注射液相