环介导恒温扩增法_LAMP_检测金黄色葡萄球菌.pdf

李永刚 ,王德国 ,武建刚 ,霍贵成 (乳品科学教育部重点实验室东北农业大学 ,黑龙江哈尔滨 150030) 摘 　要 :建立一种能够快速准确地检测金黄色葡萄球菌的 LAM P 方法 。根据金黄色葡萄球菌的 femA 基因设计了引 物 ,然后进行 LAM P反应条件的优化 、特异性和灵敏度的检测并与实际样品进行检出率的比较 。LAM P方法特异性好 , 最佳反应温度为 6 1℃,只对金黄色葡萄球菌进行扩增 ;灵敏度高 ,金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为 8～9cfu /mL 时仍能 检出。LAM P方法检测金黄色葡萄球菌特异性强 、灵敏度高、时间短且操作简便 ,有望成为快速检测金黄色葡萄球菌 的新方法 。 关键词 :金黄色葡萄球菌 , femA ,环介导恒温扩增 D etecting of S taph ylococcu s au reu s by loop- m ed ia ted isotherm a l am plif ica tion ( LAM P) m ethod L IY ong- gang, W A NG D e- guo, W U J ian - gang, HUO Gu i- cheng ( Key L ab of D airy Science,M in istry of Education ,Northea st A gricu ltu ral U n iversity, H arb in 150030, Ch ina) A b s tra c t: Th e p ap e r w a s to d e ve lop a rap id LAM P m e th od fo r d e te c tin g p a th o g e n o f S tap h y loc oc c u s a u re u s A s e t o f fou r p rmi e rs , tw o ou te r a n d tw o inn e r p rmi e rs , w a s d e s ig n e d sp e c ific a lly to re c og n iz e fem A g e n e o f S tap h y loc o c c u s a u re u s B y op tmi iz a tion o f LAM P c on d ition s a s w e ll a s d e te rm in a tion o f sp e c ific ity, s e n s itiv ity a n d d e te c tion ra te , LAM P a s s a y w a s e s ta b lis h e d Tem p e ra tu re c on d ition fo r am p lific a tion o f S tap hy lo c o c c u s a u re u s w a s op tmi iz e d a t 6 1℃Th e a s s a y h a d h ig h sp e c ific ity fo r d e te c tin g p a th o g e n ic s tra in s o f S tap h y loc oc c u s a u re u s b u t n o t o th e r irre la tive b a c te ria Th e a s s a y h a d a h ig h s e n s itiv ity w ith th e d e te c tion lmi it a s low a s 8～9