褐藻酸降解菌在海带绿烂病发生中的作用.pdf

维普资讯 第 33卷 第 2期 青 岛海 洋 大 学 学 报 33(2)：245～ 248 2003年 3月 JOURNAIOFOCEANUNIVERSITY OFQINGDAO March，2003 褐藻酸降解菌在海带绿烂病发生中的作用 王丽丽 唐学玺” 王 蒙 张培玉 (中国海洋大学海洋生命学院，青岛266003) 摘 要 从海带幼苗上病烂明显处分离得到 23株褐藻酸降解菌，并对其菌落形态、细胞形态及革兰 氏染色反应等进行了观察 。通过对褐藻酸钠的降解实验 ，筛选出4株具较高降解能力的菌株。感染实 验表明，分离到的褐藻酸降解菌为海带幼苗病烂的主要病原菌。 关键词 海带 ；褐藻酸降解菌；病烂 ；病原菌 中图法分类号 $946 文章编号 1001—1862(2003)02245—04 海带 (Laminariajaponica)是海洋水产资源的重要组成部分，是我国大规模养殖的重要经 济藻类 。我国海带总产量居世界第 1，约占世界海藻总产量的 1／2。海带被誉为天然的保健食 品，它不仅是人们喜欢食用的美味佳肴，而且具有独特的工业和药用价值，可治疗 甲状腺肿大， 并具有降低胆固醇，软化血管，缓解高血压，抗肿瘤、抗辐射、调节免疫力等独特的医疗保健价 值_lj。海带还是制碘、生产甘露醇和褐藻胶的重要工业原料 。但是近几年来，随着养殖规模的 不断扩大 ，海洋生态环境的 日益恶化，海带病害屡屡发生l3]。尤其是在培育幼苗时，常出现幼苗 绿烂病 、自烂病 、幼体畸形病以及烂苗或掉苗现象 。这些 问题在南方和北方都存在，轻则减产， 严重时甚至可 以使整个育苗工作陷入 困境，给育苗和供苗工作带来威胁，造成重大的经济损 失L4]。海带病烂是 1个复杂的问题，上世纪八九十年代我国学者对其进行了广泛的研究，其原 发因素不外乎是微生物的、生理的或生态的(与培养技术有关)，其中养殖水系中致病微生物的 大量繁殖及其作用是引起海带病烂的不可忽视的重要因素l¨]。研究表 明，褐藻酸降解菌是海带 藻体上的主要定居者，且苗期出现的病烂与菌的大量繁殖有关[6]。本文初步研究了褐藻酸降解 菌在海带病烂发生过程中的作用，为育苗和养殖过程中病烂发生的机制及其 防治提供依据 。 1 材料与方法 1．1藻体来源 健康的和出现病烂症状 的海带 (Laminariajaponica)均取 自烟 台海带育苗 厂 ，藻体大小 3～5cm。 1．2褐藻酸降解菌的分离 1．2．1培养基 采用安藤芳明选择培养基 ，配方如下 ：(NH)2S()5g，MgSO ·7HO lg， K2HPO 0．2g，FeSO ·7H2O0．01g，NaCI25g，褐藻酸钠 5g，琼脂 15g，自来水 1000mI， 国家 “973”重点基础研究发展规划项 目(G1999012004)资助 收稿I{期：200207—12；修订 日期：200212—30 王丽明，女，1979年 出生 ，硕士生。 责侄作者 维普资讯 青 岛 海 洋 大 学 学 报 pH 7．2。 1．2．2菌的分离 自育苗厂取回病藻，先用过滤海水洗净，再用无菌海水正反面反复擦洗 以 除去表面粘附的细菌，用接种环从海带病灶上取菌，进行平板划线，于 23C恒温箱中培养。5d 后挑取单菌落进行分离纯化，直至平板上的菌落形态一致 ，观察菌落形态、颜色、光泽及菌落周 围出现的透 明圈或晕圈等特点，然后将单一菌落移入斜面保存 。同时对菌进行革兰氏染色和细 胞形态观察 。 1．3褐藻酸降解菌降解能力分析 参照文献 [6]方法，将菌株分别接种到装有 6mL已灭菌 的褐藻酸钠液体培养基 的20mL试管中，接种的初始密度均为 3×10个 ／m!，接种后于 23C 培养观察，通过培养基澄清的时间长短来判断它们的降解能力。 1．4感染实验 取健康海带苗，置于无菌海水中用无菌棉球正反面反复擦洗 ，此操作在 3个 无菌培养皿 中依次进行后，用无菌海水冲洗海带，然后置于无菌培养皿中。实验菌株