左卡尼汀对心力衰竭大鼠PPAR―α及三磷酸腺苷影响.doc

左卡尼汀对心力衰竭大鼠PPAR―α及三磷酸腺苷影响 　　[摘要] 目的 研究左卡尼汀（LC）?π牧λソ叽笫蠊?氧化物酶体增殖剂激活受体-α（PPAR-α）及三磷酸腺苷（ATP）的影响。 方法 将SD雄性成年大鼠60只随机分为4组：正常对照组、心力衰竭模型组、LC低浓度组、LC高浓度组，每组15只。心力衰竭模型组和LC低、高浓度组给予异丙肾上腺素[3 mg/（kgd）]连续腹腔注射5 d建造慢性心力衰竭模型。LC低、高浓度组在首次注射异丙肾上腺素的同时给予LC腹腔注射[80、160 mg/（kgd）]。6周后行心脏彩超检查，取组织行病理切片检查，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清脑钠肽（BNP）水平，化学比色法检测大鼠心肌ATP水平，免疫印迹法（Western blot）检测PPAR-α蛋白表达。 结果 心脏彩超示LC低、高浓度组心功能较心力衰竭模型组明显改善，且LC高浓度组较LC低浓度组改善明显（P 　　[Key words] Chronic heart failure； L-carnitine； PPAR-α； Energy metabolism 心力衰竭目前是各种心血管疾病的终末期表现和最主要的死因，慢性心力衰竭发生时，会出现心肌脂肪酸的利用障碍，导致心肌细胞能量生成减少，进而恶化心功能。改善心肌能量代谢能够显著降低心力衰竭患者的全因死亡率及心力衰竭住院率。左卡尼汀（L-carnitine，LC）是改善能量代谢的药物，它通过运载游离脂肪酸进入线粒体，辅助细胞的能量代谢[1-2]，同时可以减少线粒体的氧化应激反应及氧化磷酸化，加快线粒体的利用率[3-4]。本研究通过建立大鼠慢性心力衰竭模型，观察不同浓度LC对心肌组织三磷酸腺苷（ATP）及过氧化物酶体增殖剂激活受体-α（PPAR-α）水平的影响，探讨其改变心力衰竭心脏结构、提高能量代谢、改善心功能的作用机制 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物 雄性成年SD大鼠60只，4周龄，体重280～300 g，购自济南朋悦实验动物繁育有限公司，合格证号：SCXK（鲁适应性喂养1周，随机分为4组：正常对照组、心力衰竭模型组、LC高浓度组、LC低浓度组，每组15只 1.1.2 主要药品与试剂 LC粉针（晋城海斯制药有限公司，批号：；异丙肾上腺素注射液（上海禾丰制药有限公司，批号：100166-201004）；大鼠BNP ELISA试剂盒（上海西唐生物科技有限公司）；大鼠ATP测定试剂盒（北京百奥莱博科技有限公司）；兔抗鼠PPAR-α抗体（武汉博士德生物工程有限公司） 1.2 实验方法 1.2.1 实验动物模型建立 采用腹腔注射异丙肾上腺素法[3 mg/（kgd），5 d]建造慢性心力衰竭模型，LC低、高浓度组在首次注射异丙肾上腺素的同时分别给予LC腹腔注射[80、160 mg/（kgd）]。正常对照组和心力衰竭模型组给予同等体积的生理盐水腹腔注射，连续6周。造模成功标准：造模6周后，①随机选取两只大鼠取心肌组织，苏木精-伊红（HE）染色，光镜下观察心肌组织变性坏死，符合慢性心力衰竭的心肌病理学改变；②心脏彩超检测左室射血分数（LVEF）、左室收缩末期内径（LVESD）及左室舒张末期内径（LVEDD），与对照组比较，差异有统计学意义（P 　　2.4 血清BNP?c心肌组织ATP水平 与正常对照组比较，心力衰竭模型组及LC低、高浓度组的血清BNP水平明显增高，ATP水平明显降低，差异有高度统计学意义（P 　　[5] Georgiadi A，Lichtenstein L，Degenhardt T，et al. Induction of cardiac Angptl4 by dietary fatty acids is mediated by peroxisome proliferator-activated receptor beta/delta and protects against fatty acid-induced oxidative stress[J]. Circ Res，2010，106（11）：1712-1721. [6] Robciuc MR，Skrobuk P，Anisimov A，et al. Angiopoietin-like 4 mediates PPAR delta effect on lipoprotein lipase-dependent fatty acid uptake but not on beta-oxidation in myotubes[J]. PLoS One，2012，7（10）：e46212. [7] 阿布都外