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延髓头端腹外侧部在脑梗死合并心律失常中作用 　　[摘要] 目的 探讨延髓头端腹外侧部在脑梗死合并心律失常中的作用及可能机制。 方法 112只Wistar大鼠随机分为3组：对照组（n=16）、假手术组（n=16）和模型组（n=80）。模型组再随机分为造模后30 min、1 h、2 h、4 h 和8 h组，每组16只，观察脑梗死后延髓头端腹外侧部神经元活动的变化。另40只大鼠随机分为5组：对照组（n=8）、生理盐水组（10 μL，n=8）、L-谷氨酸组（0.5 μmol，10 μL，n=8）、谷氨酸非选择性NMDA受体拮抗剂MK-801（4 nmol，10 μL）加L-谷氨酸组（n=8）和MK-801加模型组（n=8），以观察谷氨酸在脑梗死诱发心律失常中的作用。心电图用生物信号采集系统采集。脑梗死动物模型制作采用大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO），给药途径为侧脑室注射，以Fos蛋白作为神经元激活的标志物。 结果 对照组和假手术组大鼠心电图均无明显异常，模型组大鼠心律失常的发生率为78.75%（63/80），明显高于对照组（P 0.05）。 结论 脑梗死合并心律失常的发生与延髓头端腹外侧部活动增强有关，且此作用由谷氨酸激活NMDA受体介导 [关键词] 延髓头端腹外侧部；脑梗死；心律失常；谷氨酸；NMDA受体 [中图分类号] R338 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）11（a）-0011-05 脑梗死合并心律失常是脑梗死猝死的主要原因之一[1]。大量研究表明，脑自主神经功能失衡，特别是交感神经过度激活可致心律失常的发生[2]。合并心律失常的脑梗死患者存在着交感和副交感神经活动失衡[3-4]，但特异性的心电图??常与局部颅内病变之间的对应关系尚未建立。延髓头端腹外侧部（rostral ventrolateral medulla，RVLM）是脑内控制自主神经功能和心血管活动的关键脑区，本研究观察了RVLM活动变化在脑梗死合并心律失常中的作用及可能机制，以期为临床治疗提供理论依据，并丰富心血管功能活动调节的中枢机制 1 资料与方法 1.1 实验动物 健康雄性Wistar大鼠，体重（230±20）g，由哈尔滨医科大学实验动物学部提供，实验动物生产许可证号：SCXK（黑）2013-001，实验动物使用许可证号：SYXK（黑）2013-002 1.2 药物与试剂 c-Fos多克隆抗体（sc-52，Santa Cruz）、AP标记的山羊抗兔二抗（zb-2308）和AP标记的马抗小鼠二抗（zd-2310）均购自中杉金桥公司。GAPDH单克隆抗体（小鼠）购自碧云天生物技术研究所。TTC购自中国医药上海化学试剂公司 1.3 仪器 大鼠脑立体定位仪SN-3，日本Narishige；显微图像采集系统，日本Olympus；石蜡切片机RM2016，德国徕卡；凝胶成像系统，美国Alpha；RM6240B生物信号采集系统，中国成都泰盟 1.4 实验分组 所有大鼠监测心电20 min，心电图正常者用于实验。为了观察脑梗死后RVLM神经元活动的变化，112只大鼠随机分为3组：对照组（n=16）、假手术组（n=16）和模型组（n=80）。模型组再随机分为造模后30 min、1 h、2 h、4 h和8 h组，每组16只。对照组和假手术组大鼠在麻醉后或假手术操作后2 h取材，模型组大鼠在造模后相应的时间点取材。用免疫组织化学技术和Western blot技术检测每只大鼠右侧脑（缺血侧）RVLM脑区Fos蛋白的表达。为了观察谷氨酸在脑梗死诱发心律失常中的作用，40只大鼠随机分为5组，每组8只：对照组、生理盐水组（10 μL）、L-谷氨酸组（0.5 μmol，10 μL）、MK-801（4 nmol，10 μL）后20 min再L-谷氨酸组和MK-801（4 nmol，10 μL）后20 min再造模组。所有大鼠在侧脑室注射后或术后30 min取材。用Western blot技术检测每只大鼠右侧脑RVLM脑区Fos蛋白表达 1.5 脑缺血动物模型制备 水合氯醛（350 mg/kg）腹腔注射麻醉。栓线经颈总动脉、颈内动脉插入大脑中动脉，进线长度距颈总动脉分叉（17.5 ± 0.5）mm[5]。假手术组栓线到大脑中动脉起始处后立即撤回，其余操作与模型组相同 1.6 模型鉴定 神经功能学评分大于2分且TTC染色梗死区明显者计入模型组 1.6.1 神经功能学评分 神经功能学评分值为0～4分，其中，没有神经功能缺陷计0分；前肢屈曲计1分；对侧前肢轻度抓爪计2分；让大鼠自由活动，拉其尾巴后大鼠向轻瘫侧绕圈行走计3分；如果大鼠未受任何刺激自发向轻瘫侧绕圈行走计4分[6-8]