壳聚糖和羧甲基壳聚糖参数测定方法2.docVIP

壳聚糖参数测定方法 一、脱乙酰度 1.酸碱滴定法 （1）水分含量测定 称取1~2g壳聚糖样品，在60℃下烘干至恒重，计算失重，即得水分含量。 式中，W1为105℃下烘干前样品及称样皿质量（g）；W2为105℃烘干后样品及称样皿质量（g）；W0为已恒重的称样皿质量（g）。 脱乙酰度的测定。 称取0.3g 壳聚糖样品，每种样品3个重复， 放入2 5 0mL锥形瓶 中，加入0.1mol/L HCl标准溶液30mL，搅拌至完全溶解，加入 5～6滴甲基橙一苯胺蓝指示剂， 用0.1mol/L NaOH标准溶液滴定溶液变成浅黄绿色。记下NaOH的用量，根据HCl和NaOH的量，即可算出样品的脱乙酰度。 式中，C1为盐酸标准溶液浓度 (mol/L) ；C2为氢氧化钠标准溶液的浓度(mol/L)；V1为加入的盐酸标准溶液的体积( mL)；V2为滴定耗用的氢氧化钠标准溶液的体积( mL)；G为样品质量( g )；W为样品的水分(%)；0.016为与1mL 1mol/L盐酸溶液相当的氨基量( g ) 。 电位滴定法 准确称取0.2 g干燥的壳聚糖，加入25 mL的0.1 mol/L的标准HCl溶液，于磁力搅拌器上搅拌至溶解完全。 用0.1 mol/L标准氢氧化钠溶滴定，并用pH计记录相应的pH。以pH为纵坐标，V(NaOH)为横坐标作图，直线外推至与横坐标相交处为等当点时所用 NaOH 溶液的体积。计算方法同上。 线性电位滴定法 准确称取0.25g干燥至恒重的壳聚糖于100mL烧杯中，加入蒸馏水10mL及0.1mol/L标准HCl溶液20mL，室温下磁力搅拌0.5h溶解。在磁力搅拌下用0.1mol/L标准NaOH溶液滴定。根据样品量多少，加入2~4mL滴定液后开始测定，而后每加入1mL测定一次pH值。测定4点左右即可。用一下函数计算出f（V）。 式中：V0——被滴定液的体积（mL）； V——滴定液的体积（mL）； NB——NaOH标准溶液的浓度（mol/L）； [OH-]——OH-的浓度； [H+]——H+的浓度； 以 f ( V)为纵坐标V为横坐标作图, 直线外推与横坐标相交为等当点时所用的氢氧化钠标准溶液的体Ve，按下式计算壳聚糖脱乙酰度 式中：NA——盐酸标准溶液的浓度（mol/L）； VA——加入盐酸标准溶液的体积（mL）； NB——NaOH标准溶液的浓度（mol/L）； 分子量 工具/原料：乌氏粘度计，玻璃漏斗，恒温水浴，秒表，壳聚糖，氯化钠，蒸馏水 溶剂的配制： 配制0.1M氯化钠水溶液为溶剂配制0.2molL乙酸和0.1molL氯化钠水溶液以2:1的比例混合 壳聚糖溶液的配制： 4. 步骤/方法： .分别取溶剂组和实验组溶液沿洁净、干燥乌氏粘度计的内壁注入中，将粘度计垂直固定于恒温水浴（水浴温度为25±0.05℃)中,并使水浴的液面高于球C，放置15分钟； .自管口抽气,使供试品溶液的液面缓缓升高至，再开放管口，使供试品溶液在管内自然下落,用秒表准确记录液面自测定线1下降至测定线2处的流出时间； .重复测定两次，次测定值相差不得超过0.1秒,取次的平均值为供试液的流出时间。 .溶剂的流出时间0，样品的流出时间为t。 .依次计算 η(r)=t/t0 η(sp)=η(r)-1 C是聚合物溶液浓度，单位是g/100mL测定多个(通常为5个)不同浓度(C)下的相对粘度ηr和增比粘度ηsp，再将ηsp/C (称为比浓粘度)或lnηrC对C作图外推至C为0处得特性粘度 [η]。然后再按Mark-Houwink方程[η]=KMα。计算求得壳聚糖的分子量。 其中，壳聚糖：K=6598×10-3，α=0．88 图2-1和图2-2分别是CMCS取代度的滴定曲线及其微商曲线。 其中:Vl为过剩酸的滴定终点(ml); V2为羧基的滴定终点(ml); V3为-NH3+的滴定终点(ml)。 因此，V2－Vl是滴定羧基所消耗的氢氧化钠溶液体积(ml)，V3－V2是滴定-NH3+所消耗的氢氧化钠溶液体积(ml)。 按照文献报道的公式计算取代度(DS): DS=Mcts单元A/(1－58A) 其中，A=(V2－Vl)NNaOH/m;(V2－Vl)为所消耗的氢氧化钠溶液体积(ml); NNaOH一氢氧化钠溶液的浓度(mol/L）; m一产物CMCS的质量(g)。 设原料壳聚糖脱乙酰度为DD，其氨基葡萄糖单元的摩尔质量 Mcts单元=（1-DD）×203.19+DD×161.5 氨基含量 在CMCS取代度滴定曲线和滴定微商曲线上，V