选修3.2.2.1动物细胞培养和核移植技术.pptx

生活联系： 生活联系： 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 最基础的是 ——动物细胞培养技术 动物细胞工程常用的技术： 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 单克隆抗体 等 2.2动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 1.掌握动物细胞培养的概念、过程与条件。 2.了解动物细胞培养的应用。 3.掌握动物体细胞核移植技术的过程。 4.了解动物体细胞核移植技术应用前景 自主阅读P44第5段，思考下列问题： 1、什么叫动物细胞培养（animal cell culture)？ 2、动物细胞培养的原理是什么？  从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2.原理： 细胞增殖 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 3.过程： 动物机体组织 单个细胞 原代培养 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 细胞悬液 强调一：细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 原代培养：通常将直接从动物体内取出的动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养：原代培养的细胞出现接触抑制后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖。这样即为传代培养。 分类：10代内的细胞；10-50代；50代以后。 强调三：原代培养、传代培养 ▲细胞株：传代细胞一般能传到40-50代，遗传物质一般不会发生改变，叫细胞株。 细胞株、细胞系（了解即可，老课本体系） ▲细胞系：传代50代以后不能再传下去，部分细胞遗传物质发生了改变，能连续传代，获得不死性，叫细胞系。 1、选用组织时，一般用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做培养材料，而不用老龄动物的，这是为什么？ 因为幼龄组织或器官上的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 老龄动物的细胞则相反。 学习活动二：寻根问底，加深巩固 2、用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶行吗？ 不能，因为两者的最适PH不同.动物细胞培养的最适PH值为7.2-7.4，胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2-8.4，胃蛋白酶适宜PH为2.胃蛋白酶在PH为7.2-7.4的动物细胞培养中无活性。 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，由于成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖，细胞培养时要解除接触抑制。 3、用胰蛋白酶会不会把细胞消化掉？ 会消化细胞膜上的蛋白质，所以要控制好消化时间。 原代培养一般传至10代左右。 传代培养细胞一般传至 代以后就不易传下去了,少部分细胞会突变能传至无数代,遗传物质发生改变。 10 4、原代培养和传代培养的区别？50代后为什么能无限增殖？ 6.动物细胞培养能否最终培养成新个体？ 10代以内 遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 5、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为多少代以内？原因是？ 总结：动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬液 剪碎 用胰蛋白酶处理 10代细胞 转入培养瓶 40-50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液稀释 传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。 传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变） 为什么用胰蛋白酶处理？ 原代培养特点：细胞贴壁生长、接触抑制 继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。 原代培养 细胞株 细胞系 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养动物细胞应该模拟内环境的哪些条件呢？ 问题探讨： 无菌、无毒 全部的营养物质 适宜的温度和PH值 必要的气体条件 2、动物细胞培养的条件 1）无菌无毒的环境： 适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为36.5±0.5℃。适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4 液体合成培养基：（糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。 4）气体环境： 2）营养： 3）温度和pH： “95％空气+