模型第六章呼吸612节.ppt

82 3.于注射野百合碱后21d，进行肺循环、体循环血流动力学检测(通过肺动脉插管直接检测)和血气分析,并在实验结束时开胸,取出心脏，分离右心室(RV)、左心室和室间隔(LV+S)，并分别称重，按下述公式计算右心肥大指数。 右心肥大指数＝[RV/（LV+S）]×100% [注意事项] 1.对野百合碱所致的肺损伤，Wistar大鼠比SD大鼠有较大耐受性。雌性大鼠可抑制野百合碱活性，故一般用雄性大鼠。造模时体重在100~250g范围较好。 2.野百合碱虽可sc，但考虑到野百合碱经肝脏代谢后才发挥作用,腹腔注射吸收后，经门静脉首先到达肝脏，故多选择ip途径。 3.剂量过大容易诱发右心衰竭，动物死亡率高。 第八节 肺水肿动物模型 肺水肿(pulmonary edema)是指液体在肺泡间质和(或)肺泡内过多聚积所致的综合征。 肺水肿是常见的危重急症,可由多种原因引起,大多数是由于肺毛细血管壁通透性增加和(或)毛细血管内流体静压升高所致。 肺泡 血液 内皮细胞 上皮细胞 间质 O2 CO2 表面活性物质 一、油酸诱发大鼠肺水肿模型 [造模原理] 可能是由于油酸进入机体后，激活补体，产生C5a,后者趋化炎细胞聚集在肺内,释放自由基,损伤肺毛细血管内皮细胞,使之通透性增加,引起肺水肿。 [操作方法] 体重250g的SD或Wistar大鼠,性别不限。通过静脉缓慢注射油酸0.1ml/kg体重，注射油酸后不同时间处死动物,称体重,开胸，结扎气管后取出心肺，分离心脏,称肺重，测量肺系数。 二、油酸诱发家兔肺水肿模型 [操作方法] 体重2.5kg左右家兔。从兔耳缘静脉缓慢注射油酸0.08 ml/kg体重，注射油酸后不同时间处死动物，开胸取全肺，观察肺体积、肺表面色泽、气管内有无泡沫液体溢出，并称肺重，测量肺系数。 三、肾上腺素诱发大鼠肺水肿模型 [造模原理] 大剂量外源性肾上腺素进入机体后,一方面引起体血管与肺血管强烈收缩,导致肺动脉压上升,肺毛细血管内压力明显升高，水分进入肺间质，引起肺间质水肿进而累及肺泡上皮细胞，出现肺泡水肿。 另一方面肾上腺素直接作用于肺毛细血管内皮细胞，可以增强血小板和白细胞的聚集，释放氧自由基。另外，肾上腺素还可间接影响与通透性关系密切的缓激肽及组胺等，使血管内皮及肺泡上皮通透性增加。上述机制协同作用，形成致死性、蛋白漏出性肺水肿。 四、肾上腺素诱发家兔肺水肿模型 [操作方法] 家兔2.5~3kg。家兔耳缘静脉缓慢注射0.1%肾上腺素1.0ml/kg体重。 解剖可见肺脏明显肿大、膨隆、淤血、出血,切面有粉红色泡沫样液体溢出。肺湿重和肺系数可增至正常对照的2~3倍或以上。间质和肺泡内充满富含蛋白的水肿液,肺不张,萎陷,出血。 第九节 肺纤维化动物模型 肺纤维化（pulmonary fibrosis）是多种原因引起慢性肺疾病的共同结局，是呼吸衰竭的主要病理基础，其病理改变过程是肺部炎症导致肺泡持续性损伤，经反复破坏、修复、重建，最后引起细胞外基质过度沉积。 [造模原理] 博莱霉素(bleomycin)致肺纤维化的机制迄今未明，可能与自由基损伤、免疫机制和胶原调节失调等有关,其中自由基损伤可能是主要机制,活性氧造成急性肺泡炎,进而发展为肺纤维化。 [实验动物] 体重200g左右的SD或Wistar大鼠。 [主要试剂] 博莱霉素, 用生理盐水配成4mg/ml溶液.立式照明灯或额戴式喉镜；斜端聚乙烯塑料管(作为气管插管用)。 [操作步骤] 1.乙醚麻醉后, 仰位以上门齿为悬挂点使大鼠斜挂在60°鼠台上, 颈前放置照明灯 2.垫小块纱布将鼠舌拉出, 用压舌板压住舌腹, 趁动物吸气瞬间迅速将斜端聚乙烯塑料管(连1ml注射器,内盛博莱霉素NS溶液)通过声带开口插入气管4~5cm, 用棉絮试验导管是否进入气管,确定后缓慢注入博莱霉素溶液,剂量为5mg/kg(0.25ml/只)。 4.注入药液后3、7、14和28d处死动物, 收集肺标本, 部分用于检测肺羟脯氨酸含量等, 部分用中性福尔马林固定, 常规石蜡切片, HE和结缔组织染色。 3.注入药物后将动物直立旋转, 尽量使药液在肺内分布均匀。 [结果] 注入药液后3d和7d表现为肺明显急性炎症,肺间隔水肿,炎症细胞浸润,以嗜中性粒细胞和单核巨噬细胞为主, 伴有轻度出血。 14d肺脏系数(肺重/体重)增加,肺泡壁肺泡巨噬细胞、淋巴细胞等炎症细胞明显减少,成纤维细胞增多,肺泡隔明显增宽,有胶原沉积,呈斑片状纤维化改变。