浆膜腔积液的形态学及临床价值.ppt

浆膜腔积液的形态学及临床价值 陆志成 上海市第七人民医院检验科 浆膜腔积液的形态学及临床价值 引言 浆膜腔积液的形态学诊断技术是集基础理论、实验方法、染色技术、实践经验于一体的经典技术。借助于显微镜观察手段来完成。 形态学诊断 细胞形态学诊断： 细胞计数 细胞形态 病原体形态学诊断： 真菌、细菌、寄生虫等 形态学诊断是确诊某些疾病的金指标 浆膜腔积液形态学检查目的 胸水、腹水、心包积液统称为浆膜腔积液,又称腔液或积液。 正常情况下，胸膜腔液20ml，腹膜腔液50ml，心包膜腔液30ml，起润滑作用,不易采集检查。 病理情况下，有多量液体贮留，形成浆膜腔积液，可采集，进行各类实验检查。尤其是形态学诊断可为临床提供诊断良性或恶性疾患的确切信息,这是形态学检查的目的,也是临床迫切需要。 浆膜腔积液标本采集： 浆膜腔积液标本由穿刺术采集 第一管细菌学检查，必须留取于无菌试管中 第二管化学及免疫学检查（宜用肝素抗凝） 第三管常规检查（宜用EDTA-K2抗凝） 第四管不加任何抗凝剂，以观察有无凝集现象。 标本收集后必须立即送检，以防细胞变性、出现凝块或细菌破坏溶解。 浆膜腔积液检查内容： 理学检查、化学检查、显微镜检查、免疫学检查、病原生物学检查等。 理学检查 化学检查 常规检查 显微镜检查 浆膜腔积液常规检查： 颜色、透明度、蛋白定性、细胞总数计数、有核细胞计数、细胞分类。 形态学检查是显微镜检查的重要内容。 细胞总数计数 有核细胞计数 细胞分类 积液涂片在显微镜下所见形态： 细胞： 红细胞、淋巴细胞、粒细胞、巨噬细胞、间皮细胞、浆细胞、肿瘤细胞、巨核细胞、肥大细胞等。 病原体： 细菌、真菌、寄生虫、结晶等 其他：特殊形态 积液涂片 中性分叶核粒细胞 瑞吉染色 巨噬细胞 积液涂片 巨核细胞 瑞吉染色 积液涂片 间皮细胞 瑞吉染色 积液涂片 嗜酸性粒细胞增多 瑞吉染色 积液涂片 嗜碱性粒细胞增多 瑞吉染色 积液涂片 癌细胞 瑞吉染色 胸腹心包腔积液形态学诊断 积液的涂片制备、染色、观察方法及报告描述形式。更大范围地观察细胞,更高清晰度度地辨认细胞，提高阳性检出率。为临床提供形态学诊断指标。 目 的 1.提高恶性细胞检出率及其它病理阳性的检出率。 2.将用于渗出液与漏出液鉴别的传统积液常规检查提 升为可以判断积液原因和性质的一项诊断试验。 3.方法简便快速、结果准确、经济实用、 易于推广。 1. 涂片制作的涂抹法改为推片法 其方法是将离心后标本弃上清液,留约0.1~0.2ml沉渣，取沉渣10~20ul, 置于清洁玻片的右侧端,用一推玻片压在沉渣上,形成25~30℃夹角,迅速向另一侧推进,制成涂片。每份标本推6张涂片：2张有尾薄片、2张有尾厚片、2张无尾厚片。 有核细胞计数低于100×106/L的标本，采用二次离 心标本后再制作涂片。 大量血液的标本,离心后用一毛细管取有核细胞层制 作涂片。 凝固标本用一竹签插入凝固标本中,顺时针方向旋转, 挤出细胞,剔除凝块, 再离心,取沉查制片。 2. 涂片染色采用改良的瑞吉氏染色方法 瑞吉染色使细胞形态染色鲜艳、结构清晰,便于良恶性细胞的辨认和鉴定。 方法：涂片滴加瑞吉氏染液2~3滴,抹匀,覆盖涂片,置10~15秒, 再加缓冲液3~4滴,混匀,置30~40秒。流水冲洗,晾干、镜检。 瑞-吉氏染液配制 瑞氏染料 5g 吉氏染料 5g 中性甘油 20ml 1M NaOH 0.2ml 在清洁的碾钵里充分研磨，倒入盛器，再加入 中性甘油 300ml 甲醇 3000ml 混匀，染色液配好后即可使用。 3.二步扫描观察涂片 ①先用低倍镜扫描全片,发现可疑细胞后 ②再用油浸镜鉴定细胞性质 每例标本观察2-3份涂片 4.有核细胞分类 低倍镜扫描2～3份涂片后，选择细胞分布均匀处，计数100-200个有核细胞,按各占百分比报告。如中性粒细胞60%,淋巴细胞25%,巨噬细胞10%,嗜酸性粒细胞5%。同时报告其它阳性发现。应取消