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白花蛇舌草中有效成分含量测定方法研究进展
白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Wi1ld.)的干燥全草,主要含有黄酮类、三萜类、蒽醌类、环烯醚苷萜类、多糖类等成分,具有抗肝炎、抗肿瘤、抗病毒、抗炎抑菌、降血脂及降血糖等多种药理活性[1-2]。
[1]郑宏钧,詹亚华.现代中药材鉴别手册[M].北京:中国医药科技出版社,2001:798.
[2]薛存宽,沈凯,蒋鹏,等.缬草主要活性成分的初步[J].现代中西医结合杂志,2003,12(9):912-914.
近年来,对白花蛇舌草中活性成分含量测定的报道越来越多,为此本文就近十年以来其含量测定方法作一综述,并且对每一种方法的特点和适用范围进行了评述,为白花蛇舌草的质量进一步评价提供参考。
高效液相色谱法
高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)是目前中药含量测定中最常用的方法之一,它主要是利用要测定的指标成分与其他组分在流动相与固定相中的分配系数不同而把指标成分分离出来并进行含量测定。具有分析速度快、分离效率高、应用范围广、检测灵敏度高、自动化等优点,可用于分析样品中高沸点、热不稳定性、大分子量的有效成分,是中药有效成分含量测定中应用较为广泛的一种分析方法[]。使用HPLC法测定白花蛇舌草中有效成分的含量一般采用反相色谱法,但检测方式有紫外法(UV)和蒸发光散射法(ELSD).
梁生旺.中药制剂分析[M],北京:中国中医药出版社,2003:96.
1.1 UV检测的色谱条件(见表1)
表1 HPLC法测定白花蛇舌草中有效成分的色谱条件 指标成分 色谱柱 柱温 流动相 检测波长 流速 /(mm×mm,μm) /℃ /nm /mL·min-1 乙酰基车叶草苷酸、
鸡屎藤次苷 Pinnacleu C18(250×4.6,5) 25 甲醇-乙腈-1mol?L-1冰醋酸(3:2:95) 230 1.0 反式6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯 Diamonsil ODS
(250×4.6,5) 25 甲醇-水(45:55) 310 1.0 3,4-二羟基苯甲酸甲酯 DiamonsilTM ODS
(200×4.6,5) 室温 甲醇-0.05%的磷酸水溶液(15:85) 254 0.8 2-甲基-3-羟基-4-甲氧基蒽醌 Diamonsil C18
(200×4.6,5) 室温 甲醇-水(62:38) 267 1.0 2-甲基-3-羟基蒽醌 齐墩果酸、熊果酸 HiQ sil C18
(150×4.6,5) 30 甲醇-四丁基溴化铵
(20mmol?L-1)-三乙胺
(90:10:0.02)(用冰醋酸调pH6.9) 210 0.3 咖啡酸、槲皮素、山柰酚 Alhima C18 (250×4.6,5) 30 甲醇-0.5%冰醋酸梯度洗脱 350 1.0 熊果酸 Alltech RP-C18(250×4.6,5) 30 甲醇-水(90:10) 210 1.0 (E)-6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯、香豆酸 Kromasil ODS C18
(250×4.6,5) 30 乙腈-0.1%冰醋酸梯度洗脱 303 1.0 车叶草苷 Kromasil ODS C18
(250×4.6,5 ) 30 乙腈-0.2%磷酸(5:95) 240 0.8 香豆酸 DiamonsilTM ODS
(200×4.6,5) 25 甲醇-20mmolL-1:NH4AC(pH3.5)
(25:75) 308 1.0 槲皮素、山柰酚 Alltima C18(250×4.6,5) 30 甲醇-0.5%冰醋酸梯度洗脱 350 1.0 香豆酸 AgilentEclipse×DB-Cl8(250×4.6,5) 30 乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱 230 1.0 熊果酸、齐墩果酸 Lichrospher Cl8(250×4.6,5) 30 甲醇-2%醋酸(88:12) 210 1.0 槲皮素 HypersilBDSC18(200×4.6,5) 25 甲醇-水-磷酸(50:50:0.2) 370 1.0 齐墩果酸、熊果酸 AgilentC18(250×4.6,5) 20 甲醇-水-冰醋酸-三乙胺
(91.5:8.5:0.04:0.1) 210 0.8 齐墩果酸、熊果酸 Diamonsil C18
(200×4.6,5) 室温 甲醇-1%HAc(35:65) 308 1.0 齐墩果酸、熊果酸 NucledureC18(150×4.6,5) 室温 乙腈-磷酸盐缓冲液(45:55) 220 1.0 齐墩果酸、熊果酸 Lichrospher C18
(250×4.6,5)) 30 甲醇-2%冰醋酸水溶液
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