3-03生物检定法.ppt

Thank you 生物制品的效力检定 生物制品的效力，从实验室检定来讲，一是指制品中有效成分的含量水平，二是指制制品在机体中建立自动免疫或被动免疫后所引起的抗感染作用的能力。 对于诊断用品，其效力则表现在诊断试验的特异性和敏感性。制品的质量，主要是从效力上体现出来。无效的制品，不仅没有使用价值，而且可能给防疫、治疗或诊断工作带来贻误疫情或病情的严重后果。因此，必须十分重视制品的效力检定，有的制品必要时还要进行人体效果观察。 效力检定的方法有两大类：一是体外测定法；二是机体内试验法。 根据各类制品的不同性质，又有各种不同的检测方法。大体可以分以下几类。 一、动物保护力试验 将制品对动物进行自动（或被动）免疫后，用活菌、活毒或毒素攻击，从而判定制品的保护力水平。 二活菌数和活病毒数滴定P136 三、类毒素和抗毒素的生物测定 四、血清学试验 五、其他有效力的测定试验 生物检定法 **生物检定法定义：p103 生物检定属生物法分析，是利用药物对生物体（整体动物、离体组织、微生物等）的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。它以药物的药理作用为基础，统计学为工具，选用特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和相当的标准品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的计算，从而测得供试品中活性成分的效价。 由于生物差异的存在，生物检定结果误差较大，重现性比较差，需要控制的条件较多 测定费时、计算繁琐。所以，生物检定主要用于无适当理化方法进行检定的药物，补充理化检验的不足。由于科学技术的发展，一些品种的生物检定可能被理化检验代替，而一些新药的生物检定方法又在不断建立。 生物检定包括整体和离体测定 整体测定：直接反映药品对生物的综合作用，但需要动物、 需用供试品量多，耗时长、精密度和灵敏度较差。 离体测定：个体差异小，实验时间较短，精密度和敏度较高，能在一定程度上保留药理作用特性，尤其适用于微量激素的测定，缺点是不一定能反映供试品在整体的作用。 一、生物检定的应用范围 1．药物的效价测定 对一些理化方法不能测定含量或理化测定不能反映临床生物活性的药物，可用生物检定来控制药物质量。 例如洋地黄、胰岛素、肝素、绒促性素、缩官素等的生物测定法，以 及多种抗生素的微生物测定法。 有些天然药物、生物制品往往因结构复杂，而且往往又是由结构类似、比例不定的多种成分组成，很难用理化方法反映其生物活性；另一些药物，尤其是一些激素类药物，其结构相近相近，而生物活性不同；还有些药物虽可用理化方法测定含量，但含量完全不能反映效价。因此这些药物的质量控制都离不开生物检定。 2.体内微量生理活性物质的测定 一些神经介质、激素等微量生理活性物质，由于其很强的生理活性，在体内的浓度很低，加上体液中各种物质的干扰，很难用理化方法测定，而不少活性物质的生物鉴定法由于灵敏度高，专一性强，对供试品稍作处理即可直接测定。 3.中药质量的控制 中药成分复杂，大部分中药的有效成分尚未搞清，难以用理化方法加以控制，一部分中药可用一些以其疗效为基础的生物测定方法来控制其质量。 4、某些有害杂质的限度检查 如农药残留、热原质、抗生素及生化制剂中降压物质的限度检查等。 标准品 生物检定法，一般需要应用标准品，以降低由于生物差异造成的实验误差，使在不同实验室中检定同一药物时，即使实验条件或影响因素不尽相同，但由于同时作用于标准品和供式品，在比检定中这些影响因素可以互相抵消，它们之间的反应强度比例保持不变这样就大大提高了生物检定的可靠性和精密度。 药典所采用的标准品：为参照国际标准品制备的标准品，由中国药品与生物制品检定所发放，单位效价相当于国际单位效价。标准品有均匀、稳定而持久的性质，应存放于除去氧气的干燥器中，低温处避光贮放。 效价检定的基本内容 （一）生物反应是生物检定的基础 被测物特有的生物学作用都可作为生物法分析的基础，例如生长素具有促进生长、蛋白质同化、脂肪动员作用，可致糖尿、血酮，影响盐类代谢，已据之设计出多种的生长素的生物学定量法（见书上表5-1）。 （二）剂量与反应关系 生物检定是利用药物不同剂量引起生物体反应程度的变化以进行药物效价测定的，要计算效价，首先要研究剂量与反应之间的关系。 在生物检定中，剂量与反应间一般都是曲线关系，可通过各种坐标转换的方法，使剂量与反应间呈直线关系，即数学表达式为简单的直线方程：y=a+bx，最便于处理和应用。生物反应基本上可分为以下两种类型，即质反应和量反应。 *1．质反应 当一定剂量的药物注入动物体内后，观察某一反应或反应的某一特定程度出现与否例如死或不死，惊厥或不惊厥，只有出现与不出现两种情况，故不能用量来表示个体的反应程度，只能用一组动物中出现正