3.7基因工程.ppt

花粉管通道法 在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由我国学者周光宇提出，我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。 该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株，技术简单，不需要装备精良的实验室，常规育种工作者易于掌握。 1.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是--G↓GATCC--;限制酶II的识别序列和切点是--↓GATC--。 根据图示判断下列操作正确的是：( ) A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 2.（07广东）现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp，用KpnI单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子，用EcoRI,Kpnl同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（ ） 3.限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现以3种不同的限制性内切酶对6.2kb大小的线状DNA进行剪切后。用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示。请问：3种不同的限制性内切酶在此DNA片段上相应切点的位置是 ( ) 植物方面 提高植物的抗虫、抗病、抗逆性 改良植物的品质 动物方面 提高动物生长速度 用转基因动物生产药物 用转基因动物作器官移植的供体 疾病治疗 Δ基因诊断 Δ基因工程药物 Δ基因治疗 环境保护 改良植物的品质 农杆菌转化法 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。 农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。  基因枪法 利用火药爆炸或高压气体加速（这一加速设备被称为基因枪），将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比，基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建也相对简单，因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法。 (03理综）采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是：( ) ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵 A.①② B.②③ C.③④ D. ①④ Ｃ * 图解：抗虫棉的培育过程 【考点1】描述基因工程基本操作的几个步骤： ①获得目的基因　 ②目的基因与载体 结合，形成重组DNA ③重组DNA导入受体细胞　 ④目的基因的检测和表达　 ④ ③ ① ② 1.基因工程操作中最核心、最关键的一步？ 2.唯一不涉及碱基互补配对的操作步骤? 该过程把三种工具全用上了. 方法： 已知序列 未知序列 化学方法合成 PCR技术扩增 从基因文库获得 步骤1：获得目的基因（人们感兴趣的基因） 　mRNA逆转录DNA　 氨基酸 mRNA 逆转录 DNA　 推测 形成整个DNA分子 在短时间内形成大量的DNA片段 结果 细胞内含有的DNA聚合酶 热稳定的DNA聚合酶(Taq酶) 酶 主要在细胞核内 体外复制(PCR扩增仪) 场所 解旋酶催化 DNA在高温下变性解旋 解旋 方式 不同点 模板、ATP、酶、原料、引物 条件 四种游离的脱氧核苷酸 原料 DNA复制(碱基互补配对) 原理 相同点 DNA复制 PCR技术 最常用:质粒 其他:λ噬菌体、动植物病毒等 步骤2：目的基因