常用染色方法.doc

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精 毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水 100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精 10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水 95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精 25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水 100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘 1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水 300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克 蒸馏水 100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水 100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水 100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水 100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水 95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸 10.0克 甘油 20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升 棉蓝 0.02克蒸馏水 10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。11动物组织石蜡切片染色方法苏木精-伊红(HE)染色：二甲苯, Ⅱ各10 min，依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min，蒸馏水洗；入苏木精染液10 min，盐酸酒精分色4 s，自来水洗10 min；依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min，入伊红染液染色10 min；入950 mL/L及无水乙醇, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明，中性树脂封片.一、常用染色液的配制  碘-碘化钾（I2-KI）溶液 能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ； 蒸馏水300ml ； 碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。  苏丹（sudan或） 能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹干粉0.1g ； 95％酒精10ml ； 过滤后再加入10ml甘油 （2）先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。  1％醋酸洋红（aceto carmine） 酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。 配方：洋红1g ； 45％醋酸100ml 煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀），放入棕色瓶中备用。  改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine） 核染色剂。 配制步骤： 先配成三种原液，再配成染色液。 原液A：3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。 原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。 原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）。 （原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用） 染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~1.8g，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立即用，则着色能力差）。 适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。 中性红（neutral red）溶液 用于染细胞中的液泡，可