免疫缺陷动物.ppt

* * 免疫缺陷动物 兰州大学医学实验中心 免疫缺陷动物是指由于先天性遗传突变或用人工方法造成的一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物，是一类带有突变基因的动物。 一、定义 二 、分 类 三 、裸小鼠 发现与发展 1962年英国格拉斯哥医院Grist在非近交系的小鼠中 偶然发现有个别小鼠无毛。 1966年证实是由于第11对染色体基因突变所致。 1968年Pantelouris解剖发现裸鼠失去了正常的胸腺。 1969年Rygaard首先将人结肠腺癌移植获得成功。 由于裸鼠原种抵抗力差，生育力低，寿命短，不能 用于实际。和纯系BALB/c，C3H，C57BL/6小鼠交 配，不断选育，获得了三种近交系鼠新种。 裸鼠自发现以来，广泛应用于肿瘤学、免疫学和病 毒学等多个学科的研究。 生物学特性 一般特点 纯合子突变裸鼠（nu/nu）主要表现为无毛以及胸腺 缺陷。杂合子小鼠（nu/+）各方面表现正常。 体重小于同龄普通鼠，发育缓慢。 必须养育在 SPF环境中 。 繁殖方式：一般采用隐性纯合子雄性与杂合子雌鼠 交配（♂nu/nu×♀nu/+）。 解剖生理特点 胸腺残留一些上皮样细胞；淋巴组织胸腺依赖区的淋 巴细胞消失；外周血淋巴细胞减少。 虽然有原始的T细胞，但缺乏成熟的T细胞。T细胞的 辅助，抑制及杀伤功能不全。在混合淋巴细胞反应中 无有丝分裂反应，对刀豆素A或植物凝集素P亦无促分 裂原应答。 无接触敏感性，无移植排斥，无移植物抗宿主反应。 B细胞数量正常但功能有缺陷，合成的免疫球蛋白主 要是IgM，只有少量IgG。 粒细胞功能较低，NK细胞活性高。 裸鼠的应用 1、肿瘤研究上的应用 制作人类肿瘤移植瘤模型 人类肿瘤移植于动物的历史 免疫排斥问题 眼前房，脑内，地鼠的颊囊等免疫逃避部位 免疫抑制剂、射线照射的使用 裸鼠作为人类肿瘤受体 肿瘤移植瘤模型在肿瘤基础研究中的意义 添加人为因子（致突变剂，癌基因，药物等）观察肿瘤病 因及机理和治疗。 建立肿瘤细胞株，提供大量肿瘤组织供分析。 肿瘤移植瘤模型在临床肿瘤学中的意义 诊断和预后。 建立平行模型，明确诊断和跟踪预后。 个体化疗有效试验。 对于晚期和复发肿瘤有重要意义。 药物有效的标准。 肿瘤不生长；肿瘤生长缓慢；肿瘤长出后又消失； 肿瘤无转移；动物寿命延长。 肿瘤移植瘤模型制作方法 肿瘤组织块或肿瘤细胞 皮下移植 腹腔内或肾包膜下移植 原位移植 肿瘤组织 恶性程度：恶性和转移复发瘤成功率较高 种类：细胞系成功率活检标本 来源：淋巴瘤、骨肿瘤等难获成功 部位：肿瘤块的外周部接种易成活 裸鼠 遗传背景：胰腺癌接种BALB/c 成功，NIH系则失败 性别：雌激素依赖性肿瘤接种雄鼠生长慢 鼠龄：4~6周龄 动物健康状态 影响移植瘤模型制作的因素 接种部位 原位移植成功率高，移植肿瘤与人类原发瘤相似。 有些肿瘤需要接种在特定的部位（对雌激素依赖的人 乳腺癌MCF-7 细胞系，接种乳腺脂肪垫才能活）。 其他 环境：细菌病毒可以影响NK细胞活性；接种时间 越早越好，注意无菌操作。 2、放射治疗实验中的研究 3、微生物学和免疫学方面的应用 4、在遗传学上的研究和应用 5、医学其他领域的应用 寄生虫感染的动物模型，美洲锥虫，卡氏肺囊虫；皮肤（鱼鳞病）；免疫缺陷模型（麻风，结核）。 四、严重联合免疫缺陷小鼠 （Sever Combined Immunodeficient Mice, SCID mice） *