超声喷雾电离源的研制与表征.pdfVIP

第2期 杨水平等：超声喷雾电离源的研制与表征 从同轴的石英毛细管的夹层中通出。由于外界压力较低，高压气体迅速膨胀，使得在内侧形成局部真 空，形成较大的负压。实验时，样品溶液从三通管一端的石英毛细管导入，在高压载气带动下以石英毛 细管出口喷出。受负压的影响，内层毛细管输出的少量液滴迅速完成雾化过程。这些喷雾小液滴分裂 蒸发变小，静电荷分离。随着液滴蒸发液滴表面相斥的静电荷密度增大。当液滴蒸发到某一程度，液滴 表面的库仑斥力使液滴爆炸，产生的小带电液滴继续此过程。随着液滴的水分子逐渐蒸发，就可获得自 由的质子化或去质子化的气相离子。所形成的离子被引入到LTQ中，进行质量分析，从而获得相应的 质谱图。值得注意的是，毛细管喷嘴的高度必须与质谱仪入口在同一水平面上，且与质谱仪的离子入口 同轴。为了便于调节，实验时将SsI离子源固定在三 维调节架上。 2．2仪器与试剂 LTQxL质谱仪(Finnigan)；ESI源(Finnigan)； SSI源(自制)。核糖核酸A溶液(中科院上海生化 研究所)：100 4。5甲酸水溶液配制；溶 m∥L，以pH 菌酶(上海源聚生物科技公司)：100mg／L，以pH4．5 甲酸水溶液配制；甲醇(FisherScientific)：色谱纯；甲 酸(国药集团化学试剂有限公司)：色谱纯；实验用水 均为二次蒸馏水。 2．3实验方法 图1超声喷雾电亭源的装置， d幽e咖1c 10n1删啪 spmy 质谱条件：ssI．LTQ—Ms设置为正离子检测模式， ：。兰11、sche啪n。拙a鲫m 离子传输管温度为50℃一450℃，超声气(氮气)减 压阀出口压力为2～4MPa。喷雾口与进样锥口间距离为1—12mm。蛋白质溶液通过液相进样，流动 min。 相速度l一200“L／min。其它参数采由LTQ—Ms系统自动优化，所有质谱记录时间为1 在确定其它条件不变的情况下，采用核糖核酸A溶液为样品，分别考察了喷雾气压(2—4MPa)、离 口与进样锥口间距离等因素对不同价态蛋白质多电荷离子信号强度的影响。 3结果与讨论 3．1 SSI-MS谱图 实验分别采用核糖核酸A与溶菌酶进行ssI．Ms和EsI—Ms实验，所获得谱图如图2所示。图2表 明，ssI与EsI类似，能够获得生物大分子的多电荷离子，也是一种软电离源。但是，与EsI相比，SsI谱 图中离子主要分布在低电荷(即高质荷比)范围内。比如在EsI．Ms中，核糖核酸A能获得电荷数目分 因此，核糖核酸A在EsI-MS中倾向于形成多种高丰度的高价态离子(见图2a)。在不改变其它条件的 情况下，核糖核酸A在SSI中获得的谱图与ESI中获得的谱图显著不同，许多高价态离子(名=9—12)的 著加强，其丰度分别达到了90％和88％，如图2b所示。与核糖核酸A类似，溶菌酶在ESI．Ms中获得高 获得低价态多电荷离子信号(：=4—9)，主要丰度分布在：=6—8的离子，如图2d所示。值得注意的 是，在ssI中可能还获得了价态更低的离子，但是当离子的电荷数少于4时，其质荷比已经大于4000，超 出了仪器质量分析器的质量范围，因此无法检测到此信号。因此，数据表明本工作所研制的ssI离子源 能够正常工作，而且在同等条件下获得了比EsI中价态更低的离子。比较相关谱图后发现，在SsI中的 基峰的绝对强度也比相应的ESI谱图中基峰的绝对强度高，意味着ssI可能具有比ESI更高的灵敏度。 ．分析化学 第36卷 这与文献[15]的结果一致。 + k-j l l： 嚣lT a