食品中有害物质的检测-PPT.ppt

(三）酶联免疫法测定 原理： 固相酶联免疫吸附。B1特异性抗体包被于聚苯乙烯微量反应板的孔穴中，再加入样品提取液（未知抗原）及B1抗原（已知抗原），使两者与抗体进行免疫竞争反应，然后加酶底物显色，颜色的深浅取决于抗体和酶标B1抗原结合的量，即样品中B1多，则被抗体结合的B1抗原少，颜色浅，反之则深。用目测法或酶标仪B1标准样比较判断样品中B1的含量。 仪器： 黄曲霉毒素B1测定仪 由于AFT是一剧毒且强致癌性物质，使用时应特别小心应按以下规定进行实验操作和实验后的清洗消毒工作。 ①实验时应戴口罩；配标准溶液时戴手术手套。 ②若衣服被污染，须用5％次氯酸钠溶液浸泡15 —30分钟再用清水洗净。 ③对于剩余的AFT标液或阳性样液，应先用5％次氮酸钠处理后方可倒到指定的地方。 ④实验中所用的或被污染的玻璃器皿须经5％次氯酸钠溶液浸泡5分钟再清洗之。 ⑤实验完毕应用5％次氯酸钠清洗消毒实验台等。 ⑥万一手皮膜被污染，可用次氯酸纳溶液搓洗，再用肥皂水洗净。 2．赭曲霉毒素A的检测 关于赭曲霉毒素A的限量标准，1995年FAO和WHO联合专家委员会推荐赭曲霉毒素A的周摄入量不得超过100 ng／奴体重。目前，部分国家已制定了食品及饲料中赭曲霉毒素A的限量标准，我国尚未制定。赭曲霉毒素A的测定参考我国国家标准 GB／T 13111—1991 谷物和大豆中赭曲霉毒素A的测定方法。 3．单端孢霉烯族化合物的检测 我国国家标准 GB 16329---1996 规定小麦、玉米及其面粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的限量标准为≤1000μg/kg。 谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定方法参见: GB／T 14929．5—1994 . T一2毒素的测定方法参考: GB／T 14933—1994 (小麦中T一2毒素的酶联免疫吸附测定方法)。 一 种类 肉毒、血毒、刺毒、肝毒、组胺、豚毒 （二）河豚鱼毒素 河豚毒素属于小分子量、非蛋白质的神经性毒素。鱼体中含毒量在不同部位和季节有差异，卵巢含量最多，肝脏次之，血液，眼睛、腮、和皮肤都含有少许，肌肉中不含有。但鱼死后内脏毒素可渗入肌肉，此时鱼肉也含有少量毒素。河豚的毒性比剧毒的氰化钠还要大1000多倍，0．5mg即可致人于死命。宰割技术和使用量在一定程度上影响中毒的轻重。 第三节 鱼类和贝类毒素的检测 中毒症状 河豚毒素中毒后症状出现的快慢、严重程度与个体差异和毒素摄人量有关。一般摄人毒素30min出现典型中毒症状，通常症状轻者呈现自限性，但大多数中毒严重者常在17min后迅速发生呼吸麻痹和循环衰竭而致死。有报道中毒症状最快可出现在进食后的5～10min。临床上将河豚毒素中毒分为Ⅳ度，I度口唇感觉异常、呕吐、腹泻和腹痛等肠胃症状；Ⅱ度四肢和躯干感觉异常，末梢运动麻痹，但反射正常；Ⅲ度肌肉运动失调、失声、下咽和呼吸困难、心前区疼痛、发绀和低血压；Ⅳ度意识障碍、惊厥、呼吸麻痹、严重低血压和心律失常。三大常规检查可见部分患者出现血白细胞升高大于10．0×108mol·L-1。，尿蛋白(+)和大便潜血试验弱阳性。心电图检查可发现部分患者心电图异常，出现窦性心动过速(或过缓)、T波改变(双峰或增高)、Q-T间期延长、I度房室传导阻滞和ST段缺血改变等现象。 救护措施 目前对河豚中毒的最好疗法是催吐、洗胃和导泻，并及时进行人工辅助呼吸。具体措施如下： 1 排毒。口服l％ 硫酸铜溶液100ml予以催吐；后用l：5000高锰酸钾溶液或0．5％活性炭悬液洗胃；也可用高位清洁灌肠；最后口服硫酸镁导泻。 2 解毒。尚无特效解毒剂，但可用相应药物以拮抗毒素对人体的毒性 作用，如应用阿托品可拮抗毒素对心脏的毒性作用；肌注l％硝酸士的宁，可拮抗毒素对运动麻痹的作用等。 3 输液。输液可以促进毒素尽快排出及维持水和电解质的平衡。 4 中草药治疗。鲜芦根和鲜橄榄各100g洗净捣汁内服，早期可有解毒作用。 5 对症治疗。呼吸困难者可给予氧气吸人；血压下降者应用强心剂或升压药等。 检测方法 1 定性试验 1） 样品用温水浸渍10min→~搅拌→静止后过滤→滤液加适量乙酸铅→滤弃沉淀→向滤液中通人H2 过滤→滴加磷钨酸试液使胆碱等沉淀→滤液置真空干燥器干燥→多次用无水乙醇浸制→黄色残渣即可初制河豚毒素。 2 ）将残渣溶于硫酸中，加重铬酸钾少许，如果系河豚毒素，则呈绿色。 3） 残渣溶于水，加热煮沸2min消毒，冷后注入青蛙体内，数分钟后青蛙呈麻痹状，则为河豚毒素。 2 含量测定 1 ）取处理好样品5.Og置于200ml圆底烧瓶→50ml甲醇，醋酸(10 9／6) →Ph4～5→回流10～20min→离心沉淀→收集上清液→蒸去甲醇→水浴蒸至糖浆状→乙醚除去脂肪→加水至lOml。 2 )将检