HPLC仪器原理20080610.ppt

5. 色谱柱 色谱柱是HPLC分离过程的核心 * 1. 柱头螺丝 2. 过滤筛板 3. 色谱柱管刃环 4. 柱头压帽 5. 色谱柱柱管 * 零死体积连接 * ? 3微米多孔二氧化硅微球 * 品牌 固定相 粒度(μm) 表面积(m2/g) 孔径(?) 含碳量(%) 封尾 SinoChrom ODS-BP 5,10 300 120 15% Y SinoChrom ODS-AP 5,10 300 120 17% Y Hypersil ODS2 3,5,10 170 120 10% Y Hypersil BDS C18 3,5,10 170 130 11% Y Betasil C18 5,10 100 12% Y Spherisorb C18 5,10 200 80 11.5% Y Kromasil C18 5,10 330 110 20% Y LiChrosorb RP-18 5,10 300 100 16.2% Y 不同品牌填料性能参数比较 * 分析 制备 固定相颗粒粒径使用情况调查 * 实际应用中HPLC色谱固定相类型 * 柱重复性 公司信誉 柱寿命 技术支持 塔板数 柱硬件设计 产品资料 其他 选择HPLC柱优先考虑的因素 * 小粒径短柱快速色谱 制备柱 整体柱 专用色谱柱（蛋白质、肽、氨基酸、核酸、糖、手性） 高通量柱（开发新药和组合化学） 样品制备处理柱 高光洁度柱管、内衬玻璃、PEEK 色谱柱发展方向 * * 内径80mm 柱长250mm 填料：SinoChromODS-BP 粒度：20微米 最大上样量：2g 俊杰制备色谱柱 * 6. 数据处理系统 什么是工作站？ 由一台个人电脑为中心，实现色谱信号数 据采集及处理，并实时控制色谱仪各部件 的运行，从而形成闭环的控制系统，称色 谱工作站。 * 色谱工作站的基本功能 包含色谱积分仪的全部功能 仪器控制功能 计算机软件平台所提供的功能 * GPC DAD * 7. 其他 * 7.1 LU230低压梯度混合器 四进一出 电磁阀 溶剂混合器 色谱泵 总体控制与 显示电路 液晶显示 工作站 或计算机 静态混合器 * 特点 采用四入一出高质量快速响应电磁阀，保证流动相组成的准确性和稳定性；? 单片机计算扣除电磁阀启动时间，使得流动相组成变化步长减少到0.1%，提高了流动相比例精度，并且有效降低了流动相切换周期，保证流动相均匀稳定；? 基于流动相流速参数控制电磁阀切换速度设定功能，保证在较高和较低流速下流动相分配的准确性，同时延长了电磁阀寿命；? 泵后静态混合器使溶剂混合快速、均匀，保证了分析结果的重现性，同时降低了基线噪声； 计算机控制和面板设置2－4元低压梯度，实时显示各通道比例；? 可选择内置DG230在线脱气机，减小了仪器组合体积。 * * 7.2 脱气机 依利特DG230在线脱气机 * 脱气机原理图 Teflon? AF聚合物中空纤维脱气膜 * 7.3 柱温箱 * * 7.4 配件 * * 7.5 HPLC分析系统 P230 * P1201高效液相色谱仪 * LU230 P230 静态混合器 EC2000 工作站 计算机 EC2000DAD AS230 (7725i) 色谱柱 DAD230+ A B C D 废液瓶 (馏分收集器) LU230四元低压梯度分析系统(1) * P230p/P270/P280 半制备/制备系统 * 氨基酸分析系统 * 二维高效液相分析系统 * 知己知彼，百战不殆！ * Thank You! 大连依利特分析仪器有限公司 应用实验室 电话：0411 Fax) http://www.eliteHPLC.com * 示差折光检测器 RI 紫外/可见、二极管阵列检测器DAD 荧光检测器 电化学检测器 蒸发光散射检测器 联用技术：LC-MS、LC-MS-MS LC-NMR、LC-NMR-MS 4.2 常用HPLC检测器类型 * 商品HPLC检测器基本状况 电化学 2. 荧光 3. 二极管阵列 4. 示差折光 5. UV-vis 6. 放射性 7. LC-MS 8.LC-FTIR * * 单波长及可变波长紫外-可见检测器光路图 4.3 紫外-可见检测器 * 朗伯-比尔定律 * 紫外-可见检测池结构 * UV230+紫外可见检测器 * UV230+检测器特性 宽范围测定波长 集成微型光学系统和二极管阵列技术 光谱分辨率高，动态范围宽 波长准确度和重复性高 长寿命D2灯与W灯 兼容生