LC基本原理.ppt

* 液相制备色谱的方法 收集组分时，通常有以下情况： （1）可获得良好分离，主峰 使用制备柱，超载提高效率； （2）两主成分之间的小组分； 超载，分离切分使待分离组分成为主成分（富集）后，再次分离制备。 * * 应用实例：环境中有机氯农药残留量分析 固定相：薄壳型硅胶(37 ～50?m) 流动相：正己烷 流 速：1.5 mL/min 色谱柱：50cm?2.5mm(内径) 检测器：差示折光检测器 可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。 * * 稠环芳烃的分析 稠环芳烃多为致癌物质。 固定相：十八烷基硅烷化键合相 流动相：20%甲醇-水 ～100%甲醇 线性梯度淋洗，2%/min 流 速：1mL/min 柱 温：50 oC 柱 压：70 ?104 Pa 检测器：紫外检测器 * * 第六章高效液相色谱分析法 一、高效液相色谱法的特点及基本原理 Characteristic and basic principle of LC 二、液相色谱的固定相与流动相 stationary phase and mobile phase of HPLC 三、分离类型选择 choice of separating types 第一节主要分离类型与原理 high performance liquid chromatograph basic principle and main separating types * 概 述 以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法(HPLC)，是20 世纪60 年代末发展起来的一项新颖快速的分离分析色谱技术。它是在经典的液体柱色谱法的基础上，采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，引入气相色谱理论后发展起来的。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱 柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号或进行数据处理而得到分析结果。HPLC 几乎在所有学科领域都有广泛应用，可以用于绝大多数物质成分的分离分析，它和气相色谱都是应用最广泛的仪器分析技术。 * * 一、高效液相色谱法的特点及基本原理Characteristic and basic principle of LC （一）特点： 高选择性－能同时分离性质极为相似的混合物 高效能－在较短的时间内能同时分离极为复杂的混合物，一般一次色谱分析时间为几分钟到几十分钟，有些快速分析一秒钟可分析7个组分。 高灵敏度－使用高灵敏度检测器可检测10-11~10-13g 的物质，色谱不仅可以作常量分析，也可以作微量和痕量分析。 高压 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。 如氨基酸、蛋白质、生物碱、核酸、甾体、维生素、抗生素等。 * * 液相色谱法最大的特点是可以分离不可挥发或受热后不稳定的有机物，而且比气相色谱流动相的选择余地大。由于HPLC 的具有色谱柱可以反复使用，流动相可选择范围宽，流出组分容易收集，分离效率高，分析速度快，灵敏度高，操作自动化，适用范围广(样品不需气化，只需制成溶液即可)，定量分析方法的准确度高的特点，在《中国药典》中该法已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。它与气相色谱法配合使用，几乎可以承担绝大部分的有机物分离测试任务。不足之处是定性能力较差。 * * 液相色谱几个名称 高速液相色谱 (High Speed Liquid Chromatography) 高效率液相色谱 (High Efficiency Liquid Chromatography) 高压液相色谱 (High Pressure Liquid Chromatography) 高效(能)液相色谱 (High Performance Liquid Chromatography) * * GC：在不衍生情况下，GC分析样品的分子量 500； GC的样品必须是挥发性的； GC的样品必须具有良好的热稳定性。 LC：从理论上讲，LC分析样品的分子量没有限制； LC的样品必须可溶解； 由于LC的分析温度可以从低于室温到100℃－ 140℃，所以对样品热稳定性没有要求。 （二）GC与LC的区别 * * 高效液相色谱组成 * * 相关名词 色 谱 峰：色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生的