Waters检测器培训.ppt

474的操作 显示∶在一般(Normal)操作模式下，474有如下显示 Mode 显示474目前的操作模式，Normal、Program、Scan Signal 显示当前荧光发射信号的强度 Response 响应设置的大小，相当于滤波(Filter)常数 EXλ 激发波长(nm) EMλ 发射波长(nm) Gain 增益设置的大小，加在光电倍 增管上的电压，大时灵敏度高 Atten 衰减设置的大小，对10mV信号 的衰减，积分信号不起作用 键盘∶ 很多键有多个功能，需用Shift 键控制 电化学检测器 Electrochemical Detector 随着化合物被氧化或还詟，产生正比于浓度的电流 Waters 464 的面板 464的面板有显示屏、键盘及指示灯 指示灯表示∶ Cell On:464在工作状态，电极上加了电压 Run:464在工作状态，不断测定池子的电流并输出 Potential Overload:不能保持电极上的电压，一般是池及其连接部分有问题 Current Overload:电流超过满量程 Communication Error:目前不用 Shift:按下Shift键，这时可用第二功能 Waters 464 的操作 开机后，可在SELECT MODE下用蒉键选五种模式之一 DC 直流模式，常用于高灵敏度检测 SCAN 扫描模式，可得到样品的电位 - 电流图 PULSE 脉冲模式，可优化某些样品的相应，如分析离子，该模式下稳定性好而灵敏度稍低 SYSTEM 模式，对仪器进行设置 CALIBRATION 模式，对仪器自检或校正 电导检测器 Conductivity Detector Waters 432的操作 根据流动相的本底电导设定基础电压 电导检测器是温度敏感检测器，注意恒温 电导检测器是压力敏感检测器，注意选用无压力波动的溶剂输送系统 用一般色谱泵时注意，如系统反压低1000psi时，加额外的压力阻尼装置 * Plate count calculations are the most common way to evaluate column performance. The calculations above show the results from using the tangent method to calculate plates on peaks from two different columns. Note that the tangent method cuts off peak tailing. * These calculations show the difference in plate count obtained with a 5 sigma plate calculation. Note that a 5 sigma plate will measure the presence of a tail on the peak. 检测器 Waters LC School 培训教材 对检测器的要求 高灵敏度 可重现的设置 合适的带宽 快速或可变的时间常数 宽的线性响应 容易使用及保养 自我诊断功能 检测器的种类 衡量检测器的指标 灵敏度∶ S = △R / △Q △R是检测器响应值的增量 △Q是样品量的增量 噪音∶ 没有样品时检测器的最大输出信号 漂移∶ 检测器在一段时间内响应值的变化 线性动态范围∶最大线性相应与最小检出限之比 最小检测限∶样品产生两或三倍于噪音信号时的浓度 信噪比∶S/N 注意∶最小检测限不是一个单纯的检测器指标。它实际上是评价整个色谱系统的指标，包括了色谱系统、分离机理、色谱柱在内的综合性指标，信噪比亦如此 紫外-可见光检测器 基于样品池(S)中的样品对光产生吸收，有信号差 如是可变波长检测器，还有分光系统(光珊) Beers Law - BEER定律 光能量∶ P0 = 透过溶剂的光能量 P = 透过样品的光能量 光通量(透过率%)∶T=P/P0 吸光度∶ A = -log(T)= log(P0/P) 吸光度 = 单位吸光度 × 流动池长度 × 溶液浓度 即∶ A = abc 同紫外检测器灵敏度有关的因素 信号强度(S) 从BEER定律可看出 样品的种类 样品浓度及进样的体积 检测池的长度 所使用的波长，检测器的时间常数 噪音(N) 流动相 所使用的波长，灯的能量