【2017年整理】DNA和蛋白质技术.ppt

科目一考试网 / 科目一模拟考试2016 专题5　DNA和蛋白质技术 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 高频考点突破 专题5 　DNA和蛋白质技术 基础自主梳理 命题视角剖析 即时达标训练 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 基础自主梳理 一、血红蛋白的提取和分离 1．凝胶色谱法：也称____________，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 2．电泳 (1)概念：电泳是指__________在电场的作用下发生迁移的过程。 (2)特点：电泳利用待分离样品中各种分子________的差异以及分子本身的大小、____的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 分配色谱法 带电粒子 带电性质 形状 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 3．实验操作 (1)样品处理：通过红细胞的洗涤、搅拌、离心等操作收集到血红蛋白溶液。 (2)粗分离：通过透析去除血红蛋白溶液中的_______________较小的杂质。 (3)纯化：通过______________分离相对分子质量不同的蛋白质。 (4)纯度鉴定：用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行样品纯度鉴定。 相对分子质量 凝胶色谱法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、PCR技术扩增DNA片段 1．PCR技术 (1)PCR：_______________的简称，是一种体外迅速扩增____________的技术。 (2)扩增方向：总是从子链的5′端向__端延伸。 (3)引物特点：是一小段______或DNA，能与DNA母链的一段碱基序列互补配对，用于PCR的引物长度通常为________个核苷酸。 (4)原理：DNA复制原理。 (5)条件：DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种________，四种脱氧核苷酸、耐热的_______________，同时控制温度。 多聚酶链式反应 DNA片段 3′ RNA 20～30 引物 DNA聚合酶 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2．过程 (1)变性：当温度上升到________以上时，双链DNA解旋为单链。 (2)复性：温度下降为50 ℃左右时，两种______通过碱基互补配对与_______________结合。 (3)延伸：当温度上升到72 ℃左右时，四种脱氧核苷酸在___________的作用下，根据_____________原则合成新的DNA链。 3．结果：DNA聚合酶只能特异性地复制处于___________________序列，使这段固定长度的序列呈_______扩增。 90 ℃ 引物 两条单链DNA DNA聚合酶 碱基互补配对 两个引物之间的DNA 指数 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 高频考点突破 DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理 (1)血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得含核DNA的溶液。 (2)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。 (3)DNA不溶于酒精溶液；不被蛋白酶所水解；可被二苯胺染成蓝色。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 金手指驾校网 / 金手指驾驶员考试2016 Evaluation only. Created with A