几种特殊染色.pptx

Masson三色染色法 丽春红酸性品红液的配制： 丽春红（Ponceau 2R） 0.7g 酸性品红（acid fuchsin）0.35g 冰醋酸 2ml 蒸馏水 98ml 苯胺蓝液 苯胺蓝 0.2g 冰醋酸 2ml 蒸馏水 98ml 染色步骤 切片脱蜡至水，1%高锰酸钾氧化切片5min 水洗 ，1%草酸漂白1min 水洗，丽春红酸性品红液染5min 0.5%醋酸水溶液洗 1%磷钼酸分化 0.2%苯胺蓝滴染2-5min 0.5%醋酸水溶液洗 直接入无水酒精快速脱水 二甲苯透明，中性树胶封固。 结果 胶原纤维蓝色 胞质、肌纤维、红细胞红色。 注意事项 组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。 。 Masson染液每次染色前现配为佳，可使着色鲜艳。 切片在酒精中脱水，时间不宜过长，否则会将着染的颜色脱去。 切片保存所着染的颜色一般为1—2年，以后会随着时间的延长而逐渐褪去，应予注意。 用1%磷钼酸处理时可在镜下控制，见肌纤维呈红色，胶原纤维呈淡红色即可。 Gordon 和Sweets法 氨银溶液的配置 取10%硝酸银水溶液5ml,逐滴加入浓氨水，至形成沉淀物，注意氨水不能加入过多。取3%过氧化钠5ml加入，产生沉淀，再逐滴加入氨水至沉淀再度被溶解。加蒸馏水制成50ml溶液，即可使用，贮藏于4℃冰箱中。 染色步骤 切片脱蜡至水，0.5%酸性高锰酸钾氧化5分钟。 自来水洗， 1%草酸漂白1-2分钟。 自来水洗， 2%硫酸铁铵媒染切片5-10分钟。 自来水洗，蒸馏水洗两遍。 氨银溶液浸染数秒至2分钟。 蒸馏水冲洗数次。 10%福尔马林还原2分钟。 自来水洗， 0.2%氯化金调色。 自来水洗， 5%硫代硫酸钠处理3分钟。 自来水洗，核固红染核。 脱水，透明，封固。  结果： 网状纤维显示黑色， 细胞核显示红色。 注意事项 所使用的玻璃仪器，须用清洁液处理。 配制氨银溶液时，氨水加入的量不能过多或不足，过多会使液体过碱，滴染时，切片容易脱落；过少则浸染效果不佳。 切片氧化漂白应彻底，不能使残存的福尔马林留于片上，否则将导致过早还原而使浸染不均匀。 如果有某种原因而导致切片脱落时，应使用涂胶的载片，以增加附贴性。 氨银溶液以新配为佳，但也可保存于4℃冰箱中达一个月左右，这种液体易挥发，用后即须盖紧，当沉淀物出现时，该溶液应抛弃。 糖原PAS染色(淀粉酶消化法) 显示胆管基底膜和Kupffer细胞 糖原PAS染色(淀粉酶消化法) 淀粉酶溶液： α- 淀粉酶 9g 蒸馏水 120ml 1%过碘酸： 过碘酸 0.5g 蒸馏水 50ml  Schiff液： 碱性复红 1g 1mol/L盐酸 20ml 重亚硫酸钠 2g 蒸馏水 200ml 染色步骤 切片脱蜡至水 浸入淀粉酶溶液，37 ℃温箱孵浴10min 水洗后加0.5%过碘酸，37 ℃温箱孵浴10min 水洗后加Schiff液，37 ℃温箱孵浴5-10min 苏木素染核2min 分化、反蓝，脱水，透明封固。