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小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)说明书
小鼠苹果酸脱氢酶 (MDH)酶联免疫分析 (ELISA )
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,组织匀浆
及相关液体样本中苹果酸脱氢酶 (MDH)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)水平。用纯化的小鼠
苹果酸脱氢酶(MDH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入苹果酸
脱氢酶(MDH),再与 HRP 标记的苹果酸脱氢酶(MDH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体
复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸
的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的苹果酸脱氢酶(MDH)呈正相关。用酶标
仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)
浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存
说明书 1 份 1 份
封板膜 2 片 (48 ) 2 片 (96 )
密封袋 1 个 1 个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:135 U/L 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
终止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml ×20 倍)×1 瓶 (20ml ×30 倍)×1 瓶 2-8℃保存
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右 (2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心
20 分钟左右 (2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右 (2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右 (2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS (PH7.2-7.4 )稀释细胞悬液,细胞
1
浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分
钟左右 (2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4 。用液氮迅速冷冻保
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