药理及临床三七抗增殖作用的有效成分筛选及机制研究.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 6 期 2014 年 3 月 ·801 · • 药理与临床 • 三七抗增殖作用的有效成分筛选及机制研究 1* 2 1 3 3 1 1 高 洁 ，张楠楠 ，韩彦琪 ，李红艳 ，邹敏杰 ，侯媛媛 ，白 钢 1. 南开大学药学院，天津 300071 2. 天津中医药大学，天津 300193 3. 天津嘉氏堂科技有限公司，天津 300457 摘 要：目的 筛选三七抗瘢痕成纤维细胞（human hypertrophic scar fibroblasts ，HSF ）增殖作用的有效成分并研究其作用 机制。方法 采用索氏提取法将三七药材按照极性依次提取；以 MTS 法筛选其中具有较好抗 HSF 增殖作用的提取物，结合 流式细胞仪检测其对细胞周期的影响；进一步采用 HPLC 对其有效成分进行谱效分析，将其中高活性成分进行 UPLC-Q/TOF-MS 鉴定及验证，通过反向对接技术预测有效成分的抗增殖作用机制。结果 三七醋酸乙酯提取部位有较高 的抗 HSF 细胞增殖活性（P ＜0.01 ），能显著增加 G0/G1 期细胞的比例（P ＜0.01 ），降低增殖指数（proliferation index ，PI ） （P ＜0.01 ），其中主要活性成分为皂苷类化合物；以人参皂苷 Rh1 和人参皂苷 Rg1 为例的验证结果显示，这 2 种成分均能抑 制细胞的增殖且呈剂量依赖性。反向对接预测结果显示，皂苷类化合物可能通过 MAP2K1 、MAPK14 、HRAS 等靶点作用于 抗 HSF 细胞增殖相关信号通路。结论 三七醋酸乙酯提取物对瘢痕成纤维细胞增殖有抑制作用，主要成分为其中的皂苷类 化合物，其作用机制可能与调节 MAPK 、黏着斑等信号通路有关。 关键词：三七；瘢痕成纤维细胞；谱效分析；UPLC-Q/TOF-MS ；反向对接 中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)06 - 0801 - 06 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.06.012 Screening of constituents with antiproliferative activity in Panax notoginseng and their underlying mechanisms 1 2 1 3 3 1 1 GAO Jie , ZHANG Nan-nan , HAN Yan-qi , LI Hong-yan , ZOU Min-jie , HOU Yuan-yuan , BAI Gang 1. College of Pharmacy, Nankai University, Tianjin 300071, China 2. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China 3. Tianjin Jiashitang Technology Co., Ltd., Tianjin 300457, China Abstract: Objective To screen the components with potent antiproliferative effects on human hypertrophic scar fibroblasts (HSF) in Panax notoginseng and to explore their mechanisms. Method