单基因疾病分子诊断11.ppt

分子诊断不仅能早期对疾病作出确切的诊断，也能 确定个体对疾病的易感性，判别致病基因携带者并 对疾病的分期、分型、疗效监测和预后作出判断 ? 分子诊断已成为实验诊断学的一个重要组成部分 ;;分子诊断学的发展;;;分子诊断学的发展;;分子诊断学的发展;;遗传性疾病：由于人体的遗传物质发生改变所引起的疾病。 致病基因：能够导致遗传性疾病发生的基因。 遗传性疾病分为两类：单基因病、多基因病。;单基因病：是指一种遗传病的发生只受一对等位基因控制，他们的遗传方式遵循孟德尔分离定律。 多基因病：两个以上基因的结构或表达调控的改变，如糖尿病、高血压、冠心病、骨质疏松症等。 ;单基因疾病的三种遗传方式;单基因疾病的三种遗传方式;单基因疾病的三种遗传方式;3 常见的线粒体疾病;分子诊断的策略;; 点突变;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;;;片段性突变;;动态性突变;;;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;（二）遗传性疾病基因诊断的策略;2.间接诊断策略;连锁分析(linkage analysis): 是通过用一系列覆盖密度适当的遗传标志在先证者家系中进行分析，从而找到与某一遗传标志紧密连锁的致病基因，并确定该基因在染色体上的位置。 ;（三）基因诊断所采用的技术; 1.直接诊断所采用的技术;2.基因表达异常的检测;3.间接诊断所采用的技术; （2）小卫星序列 串联重复可变数目（VNTR），以 6～70bp 为单位，可重复数次至数十次，以串联形式排列，构成数量可变的串联重复序列。等位基因常常达10个以上，信息量比 RFLP大得多 。 检测方法：Southern 印迹技术、PCR技术 。 ;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;（4）单核苷酸多态性(SNP) ;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;（四）遗传标志的选择 ;（五）间接诊断的不确定性;二、单基因病的分子诊断;单基因疾病的分子诊断;;血红蛋白病;;;单基因病的分子诊断;单基因病的分子诊断;;分子诊断;;（一）血友病A的分子诊断 （二）珠蛋白合成障碍性贫血的分子诊断 ;二、单基因病的分子诊断;血友病A;;11kb/;3. FⅧ基因连锁分析—— FⅧ基因st14位点多态性检测; 血红蛋白异常包括两大类 结构变异：珠蛋白链上氨基酸序列发生改 变如镰状细胞贫血 珠蛋白链合成障碍：一部分珠蛋白链合成过多， 一部分珠蛋白链合成过少甚至不能合成，如地中 海贫血 ;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;（一）单基因疾病中常见的分子异常;一、单基因遗传性疾病的基因诊断; 1.点突变;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;2.片段性突变;3.动态性突变;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;（二）遗传性疾病基因诊断的策略;2.间接诊断策略;连锁分析(linkage analysis): 是通过用一系列覆盖密度适当的遗传标志在先证者家系中进行分析，从而找到与某一遗传标志紧密连锁的致病基因，并确定该基因在染色体上的位置 ;（三）基因诊断所采用的技术; 1.直接诊断所采用的技术;2.基因表达异常的检测;3.间接诊断所采用的技术; （2）小卫星序列 串联重复可变数目（VNTR），以 6～70bp 为单位，可重复数次至数十次，以串联形式排列，构成数量可变的串联重复序列。等位基因常常达10个以上，信息量比 RFLP大得多 。 检测方法：Southern 印迹技术、PCR技术 。 ;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;（4）单核苷酸多态性(SNP) ;一、单基因遗传性疾病的基因诊断;（四）遗传标志的选择 ;（五）间接诊断的不确定性;二、单基因病的分子诊断;（一）血友病A的分子诊断 （二）珠蛋白合成障碍性贫血的分子诊断 ;二、单基因病的分子诊断;血友病A;;11kb/;3. FⅧ基因连锁分析—— FⅧ基因st14位点多态性检测; 血红蛋白异常包括两大类 结构变异：珠蛋白链上氨基酸序列发生改 变如镰状细胞贫血 珠蛋白链合成障碍：一部分珠蛋白链合成过多， 一部分珠蛋白链合成过少甚至不能合成，如地中 海贫血 ;珠蛋白合成障碍性贫血的遗传缺陷 （1）α珠蛋白合成障碍性贫血 主要基因缺陷：α珠蛋白基因缺失 检测方法：Southern印迹技术、PCR ;α0珠蛋白合成障碍性贫血（α0--SEA型）基因缺失检测引物部位 ;（2）β珠蛋白合成障碍性贫血 基因缺陷：点突变和移码突变 检测方法：基因突变检测方法、PCR ;点突变丧